| 提要 | 第1-9页 |
| 绪论 | 第9-28页 |
| 一 PTP-3 --- 神经系统中的蛋白质酪氨酸磷酸酶 | 第9-14页 |
| （一） 蛋白质酪氨酸磷酸酶概述 | 第9-12页 |
| 1. 蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)的分类及结构特点 | 第9-10页 |
| 2. 蛋白质酪氨酸磷酸酶(PTP)在信号传导中的作用 | 第10-12页 |
| （二） 线虫蛋白质酪氨酸磷酸酶3（cPTP-3） | 第12-14页 |
| 二线虫——生命科学研究的优秀模式生物 | 第14-21页 |
| （一） 什么是线虫 | 第15-20页 |
| 1. 自然史 | 第15页 |
| 2. 线虫的解剖学 | 第15-18页 |
| 3. 生命周期 | 第18-19页 |
| 4. 发育 | 第19-20页 |
| （二） 为什么线虫是一个优秀的模式生物 | 第20-21页 |
| 三 RNA 干扰（RNA interference，RNAi） | 第21-27页 |
| （一） RNAi 的机理 | 第21-22页 |
| （二） RNAi 的生物学功能 | 第22-23页 |
| （三） RNA 干扰在线虫中的实现方法 | 第23-27页 |
| 1、在线虫中常用的RNA 干扰方法 | 第23-25页 |
| 2、喂养方法的基本原理 | 第25-27页 |
| 四 本论文的研究方案 | 第27-28页 |
| 第一章 线虫基因ptp-3-2D 与ptp-3-D1 的克隆及PTP-3-2D 蛋白的表达.. | 第28-37页 |
| 1. 实验材料 | 第28-29页 |
| ·菌株及质粒 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-33页 |
| ·基本分子生物学实验方法 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·目的片段的扩增 | 第29-30页 |
| ·克隆载体的构建和测定 | 第30-32页 |
| ·表达载体的构建和诱导表达 | 第32-33页 |
| 3. 结果与讨论 | 第33-36页 |
| 4. 小结 | 第36-37页 |
| 第二章 cPTP-3-2D 的分离纯化及抗体制备 | 第37-43页 |
| 1. 实验材料 | 第37-38页 |
| ·试剂及材料 | 第37页 |
| ·缓冲液 | 第37页 |
| ·仪器 | 第37-38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-40页 |
| ·cPTP-3-2D 的分离纯化 | 第38-39页 |
| ·cPTP-3 抗体的制备 | 第39-40页 |
| 3. 结果与讨论 | 第40-42页 |
| ·cPTP-3-2D 的分离纯化 | 第40-41页 |
| ·免疫家兔后抗体效价的检测 | 第41-42页 |
| ·免疫家兔后抗体灵敏度的检测 | 第42页 |
| 4. 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 RNAi 线虫表型的观测 | 第43-55页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| ·材料与试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43-44页 |
| 2. 实验方法 | 第44-46页 |
| ·构建表达cPTP-3-D1 的dsRNA 的菌株 | 第44页 |
| ·线虫目的蛋白PTP-3 的干扰 | 第44页 |
| ·Western blot 分析干扰情况 | 第44页 |
| ·RNAi 线虫表型观测 | 第44-46页 |
| ·线虫寿命的观测 | 第45页 |
| ·线虫非正常死亡个体数量的观测 | 第45页 |
| ·子代线虫数量的观测 | 第45页 |
| ·线虫卵裂时间的观测 | 第45页 |
| ·线虫运动周期和运动轨迹异常的观测 | 第45页 |
| ·线虫阴道发育异常及其所占比例的观测 | 第45-46页 |
| 3 结果与讨论 | 第46-53页 |
| ·RNA 干扰后线虫体内PTP-3 的western blot 检测 | 第46页 |
| ·线虫寿命的观测结果 | 第46-48页 |
| ·线虫非正常死亡的观测结果 | 第48页 |
| ·线虫子代幼虫数量的观测结果 | 第48-49页 |
| ·线虫运动周期的观测结果 | 第49-51页 |
| ·线虫运动异常的观测结果 | 第51-52页 |
| ·线虫卵裂时间的观测结果 | 第52-53页 |
| ·线虫阴道发育异常的观测结果 | 第53页 |
| 4. 小结 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 摘要 | 第65-67页 |
| Abstract | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
