缩略语表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-36页 |
正文 | 第36-89页 |
第一部分 PET32A-ABD、PET32A-PTD、PET32A-PTD-ABD、PET32A-ABD-PTD 表达载体的构建和鉴定 | 第36-51页 |
1 实验材料 | 第36-37页 |
·质粒和菌株 | 第36页 |
·主要药品试剂 | 第36页 |
·主要溶液及其配置方法 | 第36-37页 |
·主要仪器 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-46页 |
·表达质粒pET32a-ABD 的构建 | 第37-42页 |
·表达质粒pET32a-PTD 的构建 | 第42-46页 |
3 实验结果 | 第46-49页 |
·ABD 的扩增 | 第46-47页 |
·表达质粒pET32a-ABD 的构建 | 第47页 |
·表达质粒pET32a-PTD 的构建 | 第47-48页 |
·重组质粒pET32a- PTD-ABD 和pET32a - ABD - PTD 的构建 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
第二部分 PET32A-ABD、PET32A-PTD、PET32A-PTD-ABD、PET32A-ABD-PTD 融合表达质粒的蛋白表达 | 第51-60页 |
1 实验材料 | 第51-53页 |
·菌株 | 第51页 |
·主要药品试剂 | 第51页 |
·主要溶液及其配置方法 | 第51-53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
2 实验方法 | 第53-56页 |
·pET32a-PTD ,pET32a-ABD,pET32a-PTD-ABD 和pET32a-ABD-PTD 融合蛋白的原核表达和纯化 | 第53-55页 |
·蛋白质定量分析 | 第55-56页 |
3 实验结果 | 第56-58页 |
·pET32a-ABD、pET32a-PTD、pET32a-PTD-ABD、pET32a-ABD-PTD 融合蛋白的原核表达和纯化 | 第56-58页 |
·纯化蛋白pET32a-ABD、pET32a-PTD、pET32a-PTD-ABD 的定量分析 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
第三部分 PET32A-PTD、PET32A-PTD-ABD 融合蛋白跨膜转运的检测 | 第60-65页 |
1 实验材料 | 第60-61页 |
·细胞株 | 第60页 |
·主要药品试剂 | 第60页 |
·主要溶液及其配置方法 | 第60-61页 |
·主要仪器 | 第61页 |
2 方法 | 第61-62页 |
·细胞培养 | 第61页 |
·Western blotting | 第61-62页 |
·直接免疫荧光检测 | 第62页 |
3 实验结果 | 第62-64页 |
·Western blotting | 第62-63页 |
·直接免疫荧光检测 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
第四部分 PET32A-PTD-ABD 融合蛋白对K562,HL60 细胞的功能研究 | 第65-71页 |
1 实验材料 | 第65-67页 |
·细胞株 | 第65页 |
·主要药品试剂 | 第65-66页 |
·主要溶液及其配置方法 | 第66页 |
·主要仪器 | 第66-67页 |
2 实验方法 | 第67-68页 |
·细胞培养 | 第67页 |
·pET32a-PTD-ABD 融合蛋白对K562,HL60 细胞的影响测定 | 第67-68页 |
·统计学处理 | 第68页 |
3 实验结果 | 第68-70页 |
·pET32a-PTD-ABD 融合蛋白对K562,HL60 细胞生长曲线的影响 | 第68-69页 |
·pET32a-PTD-ABD 融合蛋白对K562,HL60 细胞凋亡的影响 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-71页 |
小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-89页 |
个人简历和研究成果 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-91页 |