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3C蛋白酶表达、纯化及其活性抑制的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1.引言第9-15页
   ·小RNA病毒科病毒第9页
   ·小RNA病毒科病毒基本复制周期第9-10页
   ·3C蛋白酶在病毒复制中的重要作用第10-12页
     ·3C蛋白酶的结构第10-11页
     ·3C蛋白酶在病毒复制过程中的作用第11-12页
   ·国内外对3C蛋白酶研究概况第12-14页
   ·实验研究目的和意义第14-15页
2.材料与方法第15-23页
   ·质粒、表达宿主菌第15-16页
   ·主要试剂和材料第16页
   ·主要仪器和设备第16-17页
   ·实验方法第17-23页
     ·pBV220-3C质粒抽提与酶切鉴定第17页
     ·pBV220-3C质粒测序鉴定第17页
     ·pBV220-3C质粒转化BL-21第17页
     ·PthioHisA-IL-ll质粒的扩增和转化BL-21第17页
     ·3C蛋白酶的表达第17-18页
     ·pBV220-3C包涵体的提取和洗涤第18页
     ·PthioHisA-IL-ll的表达第18-19页
     ·PthioHisA-IL-ll包涵体的提取和洗涤第19页
     ·3C蛋白酶的纯化第19-20页
     ·白细胞介导素-11的纯化第20页
     ·Bradford法测定蛋白浓度第20页
     ·不同方法对3C蛋白酶的复性第20-21页
     ·白细胞介导素-11的复性第21页
     ·两种蛋白的浓缩第21页
     ·3C蛋白酶的活性检测第21-22页
     ·动物免疫试验制备3C蛋白酶抗体第22页
     ·Western blot检测3C蛋白酶抗体试验第22页
     ·检测抗体抑制病毒情况第22-23页
3.结果第23-30页
   ·重组质粒pBV220-3C酶切鉴定结果第23页
   ·pBV220-3C质粒测序结果第23页
   ·3C蛋白酶在大肠杆菌BL-21中的诱导表达第23-24页
   ·3C蛋白酶的纯化第24-25页
   ·不同方法对3C蛋白酶的复性结果第25-26页
   ·PthioHisA-ILll表达结果和镍螯合层析柱纯化结果第26-27页
   ·3C蛋白酶酶切白细胞介导素—11融合蛋白结果第27-28页
   ·Western blot检测3C蛋白酶抗体结果第28页
   ·检测小RNA病毒病毒滴度第28-29页
   ·加入3C蛋白酶抗体抑制病毒感染Vero细胞结果第29-30页
4.讨论第30-33页
5.结论第33-34页
参考文献第34-36页
附录第36-51页
论文综述第51-57页
研究生简介第57页
攻读学位期间发表文章情况第57-58页
致谢第58-59页

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