| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 1.文献综述 | 第10-31页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第10页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的血清型分类 | 第10-11页 |
| ·杀虫晶体蛋白(ICPS) | 第11-20页 |
| ·苏云金芽胞杆菌VIPs | 第20-27页 |
| ·农业害虫甜菜夜蛾和棉铃虫 | 第27-28页 |
| ·开题设想 | 第28-31页 |
| 2.材料与方法 | 第31-44页 |
| ·材料及培养基 | 第31-35页 |
| ·供试菌株 | 第31页 |
| ·PCR扩增用引物 | 第31页 |
| ·供试害虫 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-33页 |
| ·限制性内切酶和其它酶类 | 第33页 |
| ·缓冲液 | 第33-35页 |
| ·碱法提取质粒DNA所用缓冲液 | 第33页 |
| ·DNA电泳缓冲液 | 第33页 |
| ·DNA片断回收所用缓冲液 | 第33页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)缓冲液 | 第33-34页 |
| ·其它试剂和溶液 | 第34页 |
| ·数据处理 | 第34页 |
| ·cry1,cly2,cry9及cry1I基因的PCR-RFLP鉴定体系 | 第34-35页 |
| ·Vip3A基因的PCR鉴定 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-42页 |
| ·菌株的分离 | 第35页 |
| ·土样采集方法 | 第35页 |
| ·醋酸钠-抗生素分离法 | 第35页 |
| ·PCR扩增反应体系 | 第35-36页 |
| ·热循环反应 | 第36页 |
| ·杀虫晶体蛋白SDS-PAGE | 第36页 |
| ·杀虫晶体蛋白提纯 | 第36页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的灌制 | 第36-38页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的灌制 | 第37-38页 |
| ·用考马斯亮蓝对SDS聚丙烯酰胺凝胶进行染色 | 第38页 |
| ·cry9Ea4全基因和Vip3A部分基因的克隆 | 第38-42页 |
| ·菌株及试剂 | 第38页 |
| ·Bt基因组DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(PEG法) | 第39页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因cry9Ea4和Vip3A的PCR | 第39页 |
| ·cry9Ea4基因、Vip3A部分基因的克隆 | 第39-41页 |
| ·目的DNA片段的回收 | 第39-40页 |
| ·连接反应 | 第40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第40页 |
| ·筛选 | 第40-41页 |
| ·序列测定及分析 | 第41页 |
| ·Bt质粒DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·活性测定 | 第42页 |
| ·菌种鉴定 | 第42-43页 |
| ·菌体形态特征 | 第42-43页 |
| ·培养特征 | 第43页 |
| ·生理生化特征 | 第43页 |
| ·细胞壁化学组分分析 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-55页 |
| ·菌株分离 | 第44-45页 |
| ·菌株的伴孢晶体形态的多样性 | 第45-46页 |
| ·Bt分离株SDS-PAGE | 第46-47页 |
| ·苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定 | 第47-49页 |
| ·Bt菌株Vip3A基因的鉴定 | 第49页 |
| ·菌株ZG5-4 cry9Ea4基因的克隆分析 | 第49-51页 |
| ·菌株ZG5-4中cry9Ea4全长基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·cry9Ea4基因的核苷酸序列测定与分析 | 第50-51页 |
| ·cry9Ea4氨基酸序列及蛋白质特性分析 | 第51页 |
| ·菌株HY3-2 Vip3A基因的克隆分析 | 第51-52页 |
| ·生测结果 | 第52-53页 |
| ·ZG5-4、HY3-2苏云金芽胞杆菌的鉴定 | 第53-55页 |
| ·形态特征、培养特征、生理生化特征 | 第53-55页 |
| ·菌株鉴定结果 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
