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发菜海藻糖合成酶及水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 引言第12-26页
   ·海藻糖的结构第12-13页
   ·海藻糖的理化性质第13页
   ·海藻糖的生物学功能第13-15页
   ·海藻糖对生物体组织和生物分子的保护及其机理第15-16页
   ·海藻糖合成途径及其相关基因第16-18页
   ·海藻糖的分解代谢途径及其相关基因第18页
   ·海藻糖的应用第18-21页
   ·发菜的研究进展第21-25页
     ·发菜分类学地位第21-22页
     ·发菜的形态特征第22页
     ·地理分布和生境特点第22-24页
     ·发菜的营养成份和利用现状第24页
     ·关于发菜抗逆机理的研究第24-25页
   ·本论文的研究目的和意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-42页
   ·材料第26-29页
   ·方法第29-42页
     ·发菜总DNA的提取第29-30页
     ·目的基因片断的克隆第30-33页
     ·DNA序列的测定第33页
     ·生物信息学分析第33-34页
     ·表达载体的构建第34-35页
     ·目的基因的诱导表达及鉴定第35-36页
     ·表达蛋白的纯化第36-39页
     ·诱导表达的蛋白酶活性的测定第39-42页
第三章 结果与分析第42-62页
   ·TREY 和TREH 基因的克隆第42-48页
     ·发菜总DNA的提取与完整性第42页
     ·简并引物设计及简并引物PCR第42-43页
     ·TreY 和TreH部分基因片段的克隆第43-44页
     ·TreY和 TreH 部分基因片段的测序第44-45页
     ·TreY‐TreH未知部分基因片段的克隆第45-46页
     ·TreY 和TreH 未知部分的测序第46-48页
   ·TREY 和TREH的生物信息学分析第48-56页
     ·TreY 和TreH 基因编码的蛋白一级结构预测第48-49页
     ·基因编码蛋白同源性分析第49-51页
     ·基因编码蛋白结构和理化性质分析第51-56页
   ·TREY 和TREH 在大肠杆菌中的表达第56-62页
     ·在大肠杆菌中表达载体的构建第56-59页
     ·大肠杆菌中目的基因的诱导表达第59页
     ·包含体的变性与复性第59-60页
     ·复性蛋白的纯化第60-62页
第四章 讨论第62-65页
   ·研究发菜中海藻糖代谢的意义第62-63页
     ·有助于了解发菜中海藻糖代谢机理第62-63页
   ·简并PCR的应用第63-64页
   ·生物信息学对未知蛋白的预测第64-65页
第五章 总结与展望第65-67页
   ·总结第65-66页
   ·展望第66-67页
致谢第67-68页
参考文献第68-71页
附录第71-76页

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