中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
英文缩略词 | 第8-11页 |
前言 | 第11-14页 |
材料与方法 | 第14-23页 |
1.工具酶、试剂盒 | 第14页 |
2.菌株、质粒和细胞系 | 第14页 |
3.引物设计 | 第14页 |
4.试剂和溶液 | 第14-15页 |
5.实验仪器和设备 | 第15-16页 |
6.耗材 | 第16页 |
7.方法 | 第16-23页 |
·实验流程 | 第16页 |
·中国仓鼠卵巢细胞(CHO)总RNA的提取 | 第16-17页 |
·CHO细胞的CMP-sat基因的RT-PCR | 第17-18页 |
·反转录 | 第17页 |
·CMP-sat基因的扩增 | 第17-18页 |
·克隆载体的构建及目的基因的测序鉴定 | 第18-19页 |
·CMP-sat基因表达质粒的构建 | 第19-22页 |
·目的基因和载体质粒的酶切和产物回收 | 第19页 |
·表达载体的构建 | 第19-22页 |
·表达产物的SDS-PAGE鉴定 | 第22-23页 |
实验结果 | 第23-28页 |
1.CHO细胞总RNA的提取结果 | 第23页 |
2.CMP-sat基因的RT-PCR结果 | 第23-24页 |
3.CMP-sat基因的PCR结果 | 第24页 |
4.克隆载体的鉴定与CMP-sat基因的序列测定结果 | 第24-26页 |
·CMP/pMD18-T克隆载体的酶切鉴定结果 | 第24-25页 |
·CMP-sat基因序列测定结果 | 第25-26页 |
5.CMP/pET42a表达载体的酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
6.CMP-sat基因的表达 | 第27-28页 |
讨论 | 第28-30页 |
结论 | 第30页 |
展望 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-34页 |
致谢 | 第34-35页 |
附录 | 第35-36页 |