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非洲爪蟾眼发育和晶状体再生过程中Pax6基因表达荧光定量PCR和免疫组化分析

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
前言第9-28页
   ·眼睛的结构和作用第9-10页
     ·眼球的组成第9页
     ·角膜、脉络膜、睫状体、视网膜的功能第9-10页
   ·晶状体的结构和作用第10-11页
   ·眼睛发育和晶状体诱导第11-13页
   ·晶状体再生和去分化、转分化过程第13-15页
   ·眼睛发育和晶状体再生过程中涉及的主要基因第15-21页
     ·Pax6第16-17页
     ·Sox第17-18页
     ·Maf第18-19页
     ·Prox1第19页
     ·其他转录因子第19-21页
   ·实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)第21-23页
     ·荧光染料嵌合法(SYBR Green Ⅰ)定量作用机理第21-22页
     ·内参基因的选择第22-23页
   ·免疫组织化学技术第23-24页
   ·实验动物简介第24-28页
     ·非洲爪蟾(Xenopus laevis)简介第24-25页
     ·非洲爪蟾胚胎发育主要时期简要描述第25-28页
材料与方法第28-34页
   ·实验材料第28-29页
     ·实验取材第28页
       ·胚胎发育不同期数取材第28页
       ·晶状体再生不同天数取材第28页
     ·药品与试剂第28页
     ·引物第28-29页
   ·实验方法第29-34页
     ·晶状体摘除第29页
     ·荧光定量PCR法测定Pax6基因在眼睛发育和晶状体再生过程中的表达第29-32页
       ·RNA的提取第29页
       ·Real-Time之反转录第29-30页
       ·引物扩增效果预实验第30-31页
       ·制作标准曲线第31页
       ·Real-Time PCR第31-32页
     ·免疫组织化学分析第32-34页
       ·免疫组织化学染色步骤第32-33页
       ·免疫组织化学结果分析第33-34页
结果第34-42页
   ·Real-Time PCR第34-38页
     ·RNA提取电泳图第34页
     ·引物扩增效果预实验电泳图第34页
     ·标准曲线第34-35页
     ·荧光定量结果第35-38页
       ·非洲爪蟾胚胎正常发育Pax6基因荧光定量结果第35-37页
       ·非洲爪蟾晶状体再生过程中Pax6基因表达荧光定量结果第37-38页
   ·免疫组织化学结果第38-42页
     ·非洲爪蟾晶状体再生过程中Pax6蛋白表达免疫组织化学观察第38-40页
     ·非洲爪蟾晶状体再生不同天数Pax6蛋白表达免疫组织化学平均光密度与累积光密度测量结果第40-42页
       ·晶状体再生过程中眼睛Pax6蛋白表达平均光密度与累积光密度测量结果第40页
       ·晶状体再生过程中外角膜Pax6蛋白表达平均光密度与累积光密度测量结果第40-41页
       ·晶状体再生过程中再生晶状体Pax6蛋白表达平均光密度与累积光密度测量结果第41-42页
讨论第42-48页
   ·两栖类晶状体发育、晶状体再生及其来源第42-43页
   ·非洲爪蟾晶状体再生过程中Pax6蛋白表达免疫组织化学结果分析第43页
   ·荧光定量结果分析第43-45页
     ·眼睛发育过程中Pax6基因mRNA相对定量结果分析第43-44页
     ·晶状体再生过程中Pax6基因mRNA相对定量结果分析第44-45页
   ·Pax6表达检测结果比较第45页
   ·非洲爪蟾与花背蟾蜍晶状体发育与再生过程中Pax6基因mRNA表达定量结果比较第45-46页
   ·Pax6与β-crystallin、γ-crystallin的关系第46页
   ·晶状体再生过程中,Real-Time PCR法与免疫组织化学法测定Pax6表达量的优缺点第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-54页
在学期间的研究成果第54-55页
致谢第55-56页
缩略词表第56页

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