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抗性和敏感小菜蛾(Plutella xylostella)及菜蛾啮小蜂(Oomyzus sokolowskii)ace1基因克隆与序列分析

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 文献综述第12-26页
 1 乙酰胆碱酯酶的结构和生理功能第12-14页
   ·乙酰胆碱酯酶的结构第12-13页
   ·乙酰胆碱酯酶的生理功能第13-14页
 2 昆虫乙酰胆碱酯酶基因研究进展第14-19页
   ·昆虫乙酰胆碱酯酶基因类型第14-17页
   ·乙酰胆碱酯酶基因与昆虫对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性第17页
   ·小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因突变与抗药性关系第17-19页
 3 乙酰胆碱酯酶基因突变检测技术第19-21页
   ·bi-PASA 技术原理第19-20页
   ·bi-PASA 技术特点及应用第20-21页
 4 菜蛾啮小蜂的生物学及其抗药性研究进展第21-23页
   ·菜蛾啮小蜂的生物学第21-22页
   ·寄生蜂抗药性研究进展第22-23页
 5 技术路线第23-25页
   ·小菜蛾ace 基因频率检测主要技术路线第23-24页
   ·两种类型菜蛾啮小蜂ace 克隆第24-25页
 6 研究背景、内容及目的意义第25-26页
第二章 温度对抗性和敏感小菜蛾ace1 频率的影响第26-37页
 1 材料与方法第26-30页
   ·实验材料第26-27页
     ·供试昆虫第26页
     ·主要仪器第26-27页
     ·供试试剂第27页
       ·主要试剂第27页
       ·主要试剂的配制(DNA 提取液)第27页
     ·实验中的引物序列第27页
     ·分析软件第27页
   ·实验方法第27-30页
     ·小菜蛾(Plutella xylostella)前处理第27页
     ·小菜蛾RNA 提取、逆转录及PCR 扩增第27-29页
       ·小菜蛾RNA 提取第27-28页
       ·cDNA 合成第28-29页
       ·PCR 扩增第29页
     ·基因组DNA 提取及PCR 检测第29-30页
       ·基因组DNA 提取第29页
       ·bi-PASA 检测第29-30页
 2 小菜蛾乙酰胆碱酯酶基因序列与频率检测结果分析第30-35页
   ·田间抗性小菜蛾ace 片段序列第30页
   ·田间小菜蛾ace 片段P.x-ace 序列分析第30-31页
   ·小菜蛾ace 基因频率检测结果分析第31-34页
   ·小结第34-35页
 3 讨论第35-37页
第三章 抗性和敏感菜蛾啮小蜂ace1 片段克隆及序列分析第37-50页
 1 材料与方法第37-42页
   ·实验材料第37页
     ·供试昆虫第37页
     ·主要仪器第37页
     ·分析软件第37页
     ·主要试剂第37页
     ·实验中的引物第37页
   ·菜蛾啮小蜂RNA 提取、逆转录及PCR 扩增第37-42页
     ·菜蛾啮小蜂总RNA 提取(TIANGEN 试剂盒法)第37-38页
     ·逆转录合成cDNA第38-39页
     ·抗性菜蛾啮小蜂ace 片段扩增及3’RACE 扩增第39-40页
       ·利用简并引物扩增中间片段第39-40页
       ·3’RACE 扩增第40页
     ·敏感菜蛾啮小蜂ace 片段扩增及3’RACE 扩增第40-42页
       ·敏感菜蛾啮小蜂ace 片段扩增第40-41页
       ·3’RACE 扩增第41-42页
 2 结果与分析第42-49页
   ·抗性菜蛾啮小蜂ace 序列的结果与分析第42-44页
     ·抗性菜蛾啮小蜂简并引物扩增结果分析第42-43页
     ·3’RACE 结果分析第43-44页
   ·敏感菜蛾啮小蜂ace 序列结果与分析第44-46页
     ·敏感菜蛾啮小蜂ace 特异序列结果与分析第44-45页
     ·3’RACE 结果分析第45页
     ·两段序列(OS –ace51 和OS –ace52)拼接序列分析第45-46页
   ·菜蛾啮小蜂乙酰胆碱酯酶与其他物种的比对分析第46-48页
   ·小结第48-49页
 3 讨论第49-50页
参考文献第50-54页
致谢第54页

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