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中国水仙离体形态发生的生理变化与遗传变异研究

缩写词第1-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-17页
第一章 引言第17-31页
 1 植物离体形态发生的细胞组织学、生理变化及遗传变异研究进展第17-23页
   ·植物离体形态发生的概念及途径第17页
   ·植物离体形态发生的细胞组织学研究第17-18页
   ·植物离体形态发生的生理变化研究第18-19页
   ·植物离体形态发生的遗传变异研究第19-23页
     ·遗传变异的类型第19页
     ·影响遗传变异的因素第19-21页
     ·遗传变异的机理第21-22页
     ·遗传变异的检测方法第22-23页
 2 水仙花相关研究进展第23-30页
   ·离体培养第23-28页
     ·无菌体系的建立第23页
     ·器官发生途径第23-28页
     ·体细胞胚发生途径第28页
     ·再生小鳞茎的继代增殖第28页
     ·再生小鳞茎的壮苗生根培养第28页
   ·细胞组织学第28-29页
   ·生理变化第29页
   ·遗传变异第29页
   ·水仙花离体形态发生的相关研究中存在的问题第29-30页
 3 本研究的内容和意义第30-31页
   ·本研究的内容第30页
   ·本研究的意义第30-31页
第二章 中国水仙高效离体培养体系的建立第31-57页
 第一节 中国水仙鳞茎盘切块高效离体再生体系的建立第31-41页
  1 材料与方法第31-33页
   ·材料第31页
   ·方法第31-33页
     ·外植体的消毒及接种第31-32页
     ·不同添加物对小鳞茎直接诱导的影响第32页
     ·不同激素组合对鳞茎盘切块诱导愈伤组织的影响第32页
     ·不同激素组合对鳞茎盘切块来源的愈伤组织分化的影响第32页
     ·培养条件第32-33页
     ·数据处理第33页
  2 结果与分析第33-40页
   ·最佳消毒方法的确定第33-36页
     ·不同消毒处理对无菌系建立的影响第33-34页
     ·不同消毒处理因素对消毒效果的影响第34页
     ·不同多菌灵浸泡时间对无菌系建立的影响第34-36页
   ·不同添加物对小鳞茎直接诱导的影响第36-38页
     ·不同天然添加物对小鳞茎直接诱导的影响第36-37页
     ·不同浓度的甜菜碱对小鳞茎直接诱导的影响第37-38页
   ·不同激素组合对鳞茎盘切块愈伤组织诱导的影响第38-39页
   ·不同激素组合对愈伤组织分化的影响第39-40页
  3 讨论第40-41页
   ·中国水仙鳞茎无菌系建立的关键技术措施第40页
   ·添加物在小鳞茎直接诱导中的作用第40-41页
   ·中国水仙鳞茎盘切块愈伤组织诱导中激素间的互作关系第41页
   ·中国水仙鳞茎盘切块愈伤组织培养中存在的问题及解决办法的探讨第41页
 第二节 中国水仙子房切片高效离体再生体系的建立第41-47页
  1 材料与方法第41-44页
   ·材料第41页
   ·方法第41-44页
     ·鳞茎预处理及外植体的取材第41-42页
     ·外植体的消毒及接种第42页
     ·中国水仙子房切片直接诱导小鳞茎第42页
     ·中国水仙子房切片诱导愈伤组织第42-43页
     ·中国水仙子房切片形成的不同类型的愈伤组织诱导小鳞茎再生第43页
     ·培养条件第43页
     ·数据处理第43-44页
  2 结果与分析第44-46页
   ·中国水仙子房切片直接诱导小鳞茎第44页
   ·中国水仙子房切片诱导愈伤组织第44-45页
     ·不同激素组合对子房切片愈伤组织诱导的影响第44-45页
     ·不同基因型及不同发育时期的子房切片对愈伤组织诱导的影响第45页
   ·中国水仙子房切片形成的不同类型的愈伤组织诱导小鳞茎再生第45-46页
  3 讨论第46-47页
   ·高浓度的6-BA 和成熟度较低的外植体有利于小鳞茎的直接发生第46-47页
   ·中国水仙子房切片愈伤组织诱导的影响因素第47页
   ·提高中国水仙子房切片愈伤组织小鳞茎再生效果的关键措施第47页
 第三节 中国水仙离体再生小鳞茎的膨大培养第47-52页
  1 材料与方法第48页
   ·材料第48页
   ·方法第48页
     ·不同多效唑浓度对小鳞茎膨大培养的影响第48页
     ·不同浓度的激素和多效唑对小鳞茎膨大培养的影响第48页
     ·培养条件第48页
     ·数据处理第48页
  2 结果与分析第48-51页
   ·不同多效唑浓度对小鳞茎膨大培养的影响第48-49页
   ·不同浓度激素和多效唑对小鳞茎膨大培养的影响第49-50页
   ·不同因素对小鳞茎膨大培养的影响第50-51页
  3 讨论第51-52页
   ·多效唑对中国水仙离体再生小鳞茎膨大培养具有明显的促进作用第51-52页
   ·中国水仙离体再生小鳞茎膨大培养的意义第52页
 第四节 中国水仙试管小鳞茎的继代增殖、壮苗生根及移栽第52-57页
  1 材料与方法第52-53页
   ·材料第52-53页
   ·方法第53页
     ·继代增殖培养第53页
     ·壮苗生根培养第53页
     ·炼苗与移栽第53页
     ·培养条件第53页
     ·数据处理第53页
  2 结果与分析第53-56页
   ·不同浓度6-BA 及白砂糖对试管小鳞茎继代增殖的影响第53-54页
   ·不同浓度无机盐和活性炭对试管小鳞茎壮苗生根的影响第54-55页
   ·不同移栽基质及预处理对中国水仙移栽成活率的影响第55-56页
  3 讨论第56-57页
   ·高浓度的6-BA 和中浓度的白砂糖比较适合试管小鳞茎的继代增殖第56页
   ·无机盐浓度与试管小鳞茎壮苗生根培养的相关性第56页
   ·确保水仙花试管小鳞茎移栽成活的关键技术措施第56-57页
第三章 中国水仙子房切片愈伤组织的细胞组织学观察第57-61页
 1 材料与方法第57-58页
   ·材料第57页
   ·方法第57-58页
     ·材料的选取与固定第57页
     ·材料的染色第57页
     ·水洗、返蓝第57页
     ·材料的脱水第57页
     ·材料的透明、浸蜡第57页
     ·材料的包埋第57页
     ·切片、粘片、展片和干片第57-58页
     ·材料的脱蜡、封片、观察第58页
 2 结果与分析第58-60页
   ·中国水仙子房切片愈伤组织石蜡切片方法的建立第58-59页
     ·材料的固定与染色第58页
     ·材料的脱水第58-59页
     ·材料的浸蜡与包埋第59页
     ·材料的切片、粘片、展片第59页
     ·材料的脱蜡、封片第59页
   ·中国水仙不同类型愈伤组织的切片观察第59-60页
     ·不同发育时期子房切片来源的愈伤组织的细胞组织学特征比较第59页
     ·同一发育时期子房切片来源的三种类型愈伤组织的细胞组织学特征比较第59-60页
 3 讨论第60-61页
   ·形成中国水仙子房切片不同类型愈伤组织之间细胞组织学差异的原因第60页
   ·中国水仙子房切片各种类型愈伤组织的细胞结构与分化的关系第60-61页
第四章 中国水仙愈伤组织分化过程中的若干生理变化第61-82页
 第一节 中国水仙愈伤组织分化过程中抗氧化酶活性与可溶性蛋白含量测定第61-71页
  1 材料与方法第61-64页
   ·材料第61页
   ·方法第61-64页
     ·取材与材料处理第61-62页
     ·抗氧化酶活性测定第62-63页
     ·可溶性蛋白含量测定第63-64页
  2 结果与分析第64-70页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的 POD 活性变化第64-66页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的 POD 活性变化第65页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的 POD 活性变化第65-66页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的 SOD 活性变化第66-67页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的 SOD 活性变化第66-67页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的 SOD 活性变化第67页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的 CAT 活性变化第67-68页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的 CAT 活性变化第67-68页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的 CAT 活性变化第68页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的可溶性蛋白质含量变化第68-70页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的可溶性蛋白质含量变化第68-69页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的可溶性蛋白质含量变化第69-70页
  3 讨论第70-71页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的抗氧化酶活性变化与分化的关系第70-71页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中可溶性蛋白质含量变化与分化的关系第71页
 第二节 中国水仙愈伤组织分化过程中可溶性糖与淀粉含量测定第71-82页
  1 材料与方法第71-75页
   ·材料第71-72页
   ·方法第72-75页
     ·取材第72页
     ·葡萄糖含量测定第72-74页
     ·淀粉含量测定第74-75页
  2 结果与分析第75-80页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的葡萄糖含量变化第75-76页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的葡萄糖含量变化第75页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的葡萄糖含量变化第75-76页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的果糖含量变化第76-77页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的果糖含量变化第76-77页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的果糖含量变化第77页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的蔗糖含量变化第77-79页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的蔗糖含量变化第77-78页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的蔗糖含量变化第78-79页
   ·中国水仙愈伤组织分化过程中的淀粉含量变化第79-80页
     ·不同类型愈伤组织分化过程中的淀粉含量变化第79页
     ·不同来源的愈伤组织分化过程中的淀粉含量变化第79-80页
  3 讨论第80-82页
   ·中国水仙愈伤分化过程中可溶性糖含量变化与分化的关系第80页
   ·中国水仙愈伤分化过程中淀粉含量变化与愈伤组织分化的进程基本同步第80-81页
   ·中国水仙愈伤分化过程中可溶性总糖与淀粉含量变化的关系第81-82页
第五章 中国水仙离体形态发生的遗传稳定性检测第82-106页
 第一节 中国水仙不同再生途径组培苗遗传稳定性的细胞学检测第82-88页
  1 材料与方法第82-84页
   ·材料第83页
   ·仪器与试剂第83页
     ·主要仪器设备第83页
     ·主要试验试剂第83页
     ·主要溶液配制第83页
   ·方法第83-84页
     ·染色体制片步骤的初步确定第83-84页
     ·染色体制片技术的优化第84页
     ·数据统计第84页
  2 结果与分析第84-87页
   ·染色体最佳制片技术的确定第84-86页
     ·取材时间的确定第84-85页
     ·预处理时间的确定第85页
     ·解离时间的确定第85-86页
   ·中国水仙再生小鳞茎壮苗生根阶段根尖细胞的染色体数目变异分析第86-87页
  3 讨论第87-88页
   ·染色体制片技术的关键步骤第87页
   ·经离体培养后中国水仙在细胞学水平上保持了较高的遗传稳定性第87页
   ·引起离体形态发生后少数细胞染色体数目产生不同程度变异的原因分析第87-88页
 第二节 中国水仙不同离体器官发生途径中遗传稳定性的 ISSR 检测第88-106页
  1 材料与方法第89-93页
   ·材料第89页
   ·仪器与试剂第89-91页
     ·主要仪器设备第89页
     ·主要试验试剂第89-90页
     ·主要溶液配制第90-91页
   ·ISSR 分析方法第91-93页
     ·中国水仙基因组 DNA 的提取第91页
     ·中国水仙基因组 DNA 的纯化第91页
     ·中国水仙基因组 DNA 质量检测第91-92页
     ·ISSR–PCR 扩增反应引物的筛选第92页
     ·ISSR-PCR 反应体系及程序第92页
     ·ISSR–PCR 扩增反应产物的检测第92-93页
     ·统计分析方法第93页
  2 结果与分析第93-103页
   ·中国水仙离体培养物DNA 的提取及质量检测第93-95页
   ·引物及退火温度对 PCR 结果的影响第95-96页
   ·中国水仙鳞茎盘切块离体形态发生遗传稳定性的ISSR 检测第96-100页
     ·直接器官发生途径中不同培养阶段的培养物遗传稳定性分析第96-98页
     ·间接器官发生途径中不同培养阶段的培养物遗传稳定性分析第98页
     ·愈伤组织来源的离体培养物及再生植株之间的遗传变异分析第98-100页
   ·中国水仙子房切片离体形态发生遗传稳定性的ISSR 检测第100-103页
     ·直接器官发生途径中不同培养阶段的培养物遗传稳定性分析第100-101页
     ·间接器官发生途径中不同培养阶段的培养物遗传稳定性分析第101-102页
     ·愈伤组织来源的离体培养物及再生植株之间的遗传变异分析第102-103页
  3 讨论第103-106页
   ·引物退火温度对ISSR-PCR 扩增反应有重要影响第103-104页
   ·中国水仙不同离体形态发生途径遗传变异差异分析第104页
   ·中国水仙同一外植体来源的离体培养物其形态与遗传稳定性的关系问题第104-105页
   ·细胞水平和分子水平上检测中国水仙离体形态发生遗传变异差异分析第105页
   ·中国水仙离体形态发生的遗传变异规律与利用途径的关系第105-106页
第六章 小结第106-109页
 1 中国水仙高效离体培养体系的建立第106-107页
 2 中国水仙子房切片愈伤组织的细胞组织学观察第107页
 3 中国水仙愈伤组织分化过程中的若干生理变化第107-108页
 4 中国水仙离体形态发生的遗传稳定性检测第108-109页
参考文献第109-120页
图版及图版说明第120-140页
附录 在学期间参加学术会议情况第140-141页
致谢第141页

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