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表达绿色荧光蛋白的猪伪狂犬病病毒与猪细小病毒VP2基因的重组病毒的构建

致谢第1-9页
摘要第9-10页
第一章 文献综述第10-31页
 1. 伪狂犬病毒(PRV)研究进展第10-18页
   ·PRV 的病原学特征第10-13页
     ·PRV 的分类第10页
     ·PRV 基因组结构第10-13页
   ·伪狂犬病病毒诊断方法研究进展第13-15页
     ·病原学方法第13-14页
     ·血清学方法第14-15页
   ·PRV 基因工程疫苗研究进展第15-18页
     ·PRV 基因缺失疫苗第15-17页
     ·PRV 活载体疫苗第17-18页
 2. 猪细小病毒(PPV)研究进展第18-24页
   ·PPV 病原学的特征第18-19页
   ·PPV 的分子生物学研究进展第19-20页
     ·PPV 的基因组结构第19-20页
     ·PPV DNA 的复制特点第20页
   ·PPV 基因组编码蛋白第20-22页
     ·结构蛋白第20-21页
     ·非结构蛋白第21-22页
   ·PPV 疫苗研究进展第22-24页
     ·PPV 弱毒疫苗第22页
     ·PPV 灭活疫苗第22-23页
     ·PPV 基因工程疫苗第23-24页
 3. 绿色荧光蛋白(GFP)研究进展第24-31页
   ·GFP 的分子结构第25页
   ·GFP 的生化性质第25-26页
   ·影响GFP 表达强度的因素第26页
   ·GFP 在生物学研究中的应用第26-30页
   ·展望第30-31页
第二章 试验研究第31-54页
 实验一、表达绿色荧光蛋白的猪伪狂犬病病毒与猪细小病毒VP2基因转移载体的构建第31-46页
  引言第31页
  1 材料与方法第31-40页
   ·材料第31-34页
   ·方法第34-40页
     ·重组质粒PT-VP2的构建第34-36页
     ·PPV VP2基因的扩增与克隆第36-37页
     ·重组质粒PT-VP2的鉴定第37页
     ·含VP2基因转移质粒PG-VP2的的构建第37-38页
     ·PG 质粒的改造第38页
     ·转移载体PG-VP2 的构建第38-40页
     ·序列测定第40页
     ·重组质粒及细菌的保存第40页
  2 结果第40-43页
   ·质粒GH 的酶切鉴定第40-41页
   ·PPV VP2 PCR 扩增结果与分析第41页
   ·重组质粒PT-VP2的PCR 鉴定第41-42页
   ·PG 质粒的酶切鉴定与 PCR 扩增鉴定第42页
   ·连接质粒PG-VP2 的酶切鉴定第42-43页
   ·连接质粒PG-VP2 的PCR 鉴定第43页
   ·序列测定第43页
  3 讨论与分析第43-45页
   ·绿色荧光蛋白基因(GFP)与其他几种报告基因的对比第44页
   ·抽提与胶回收纯化 DNA 的比较第44页
   ·关于伪狂犬病病毒转移载体及构建第44-45页
   ·关于 PRV gG 基因第45页
  4 结论第45-46页
 实验二、表达绿色荧光蛋白的猪伪狂犬病病毒与猪细小病毒VP2基因重组病毒的构建第46-54页
  引言第46页
  1 材料与方法第46-50页
   ·材料第46-47页
   ·方法第47-50页
     ·细胞的准备第47-48页
     ·PRV 病毒的增殖与收获第48页
     ·病毒DNA 的提取第48页
     ·重组转移载体质粒(PG-VP2)的提取第48-49页
     ·转染用细胞的准备第49页
     ·转移载体质粒(PG-VP2)DNA 与PRV 基因组 DNA 的共转染第49页
     ·重组病毒的筛选与纯化第49-50页
  2 结果与分析第50-51页
   2. 1 转移质粒 DNA 的提取第50页
   ·PRV 病毒DNA 的提取第50页
   ·转移载体质粒与病毒DNA 的共转染第50-51页
   ·重组病毒的筛选与纯化第51页
  3 分析与讨论第51-53页
   ·关于病毒 DNA 的提取第51页
   ·关于转移载体质粒DNA 的提取第51页
   ·转移载体质粒与病毒DNA 共转染效率的优化第51-52页
   ·关于重组病毒的构建第52-53页
  4 小结第53-54页
参考文献第54-63页
英文摘要第63页

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