| 提要 | 第1-9页 |
| 中英文缩写 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-29页 |
| 综述1 树突状细胞的研究进展 | 第11-21页 |
| ·DC 的分类及分化发育成熟 | 第11-12页 |
| ·DC 的迁移机制 | 第12-13页 |
| ·DC 的抗原处理与提呈功能 | 第13-14页 |
| ·DC 在机体免疫系统中的作用 | 第14-16页 |
| ·DC 的体外制备 | 第16-17页 |
| ·DC 肿瘤疫苗 | 第17-20页 |
| ·展望 | 第20-21页 |
| 综述2 RNA 转染树突状细胞制备肿瘤疫苗的研究进展 | 第21-29页 |
| ·DC 肿瘤疫苗与RNA-DC 肿瘤疫苗 | 第21-25页 |
| ·RNA-DC 疫苗诱导人抗原特异性CTL 的体外研究 | 第25-26页 |
| ·RNA-DC 疫苗的临床研究 | 第26-28页 |
| ·结语 | 第28-29页 |
| 前言 | 第29-34页 |
| 第1章 人外周血单个核细胞来源的树突状细胞体外培养及鉴定 | 第34-42页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·DC 的体外诱导 | 第35-36页 |
| ·DC 形态学观察 | 第36页 |
| ·流式细胞术检测细胞表型 | 第36页 |
| ·MTT 法检测DC 刺激T 细胞增殖能力 | 第36页 |
| ·统计学方法 | 第36-37页 |
| ·实验结果 | 第37-39页 |
| ·DC 形态学观察 | 第37-38页 |
| ·DC 表型检测 | 第38-39页 |
| ·DC 刺激T 细胞增殖能力 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第2章 人癌胚抗原基因的克隆及体外转录 | 第42-53页 |
| ·材料与仪器 | 第42页 |
| ·主要材料 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-48页 |
| ·SW480 细胞培养 | 第42-43页 |
| ·SW480 细胞总RNA 提取 | 第43页 |
| ·RT- PCR 方法扩增CEA cDNA | 第43-44页 |
| ·CEA 克隆载体pMD18-T-CEA 的构建与鉴定 | 第44-46页 |
| ·CEA 基因mRNA 体外转录载体pcDNA3.1-CEA 的构建 | 第46-47页 |
| ·CEA 基因的体外转录 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-51页 |
| ·SW480 细胞总RNA 提取 | 第48页 |
| ·CEAcDNA（两端带有XbaI 和EcoR I 酶切位点）的获得 | 第48-49页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-CEA 的双酶切鉴定 | 第49页 |
| ·重组克隆质粒pMD18-T-CEA 测序鉴定 | 第49页 |
| ·重组体外转录质粒pcDNA3.1-CEA 双酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·pcDNA3.1-CEA 体外转录为CEAmRNA | 第50-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第3章 癌胚抗原mRNA 负载成熟树突状细胞体外诱导的特异性抗肿瘤作用 | 第53-66页 |
| ·材料与仪器 | 第53页 |
| ·主要材料 | 第53页 |
| ·主要仪器和耗材 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·外周血DC 的体外诱导与培养 | 第53-54页 |
| ·复苏同种异体T 淋巴细胞 | 第54页 |
| ·CEAmRNA 体外负载DC | 第54页 |
| ·转染后mDC 内CEA 蛋白表达 | 第54-55页 |
| ·电穿孔对DC 的影响检测 | 第55页 |
| ·MTT 法检测DC 刺激T 细胞增殖能力 | 第55-56页 |
| ·ELISA 法检测负载CEAmRNA 后的DC IL-12 分泌水平 | 第56-57页 |
| ·CEAmRNA 负载DC 后体外诱导CTL 及特异性细胞毒实验 | 第57页 |
| ·ELISA 法检测诱导的CTL IFN-γ分泌 | 第57页 |
| ·统计学方法 | 第57页 |
| ·实验结果 | 第57-62页 |
| ·转染后DC 内CEA 表达 | 第57-59页 |
| ·电穿孔对DC 的影响 | 第59-60页 |
| ·各组DC 刺激T 细胞增殖能力 | 第60页 |
| ·各组DC IL-12 分泌水平 | 第60-61页 |
| ·转染CEA 的DC 诱导的特异性细胞毒效应 | 第61-62页 |
| ·转染CEAmRNA 的DC 诱导CTL 的IFN-γ分泌 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第4章 SW480 总RNA 负载成熟树突状细胞体外诱导的特异性抗肿瘤作用 | 第66-76页 |
| ·材料与仪器 | 第66页 |
| ·主要材料 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·细胞培养 | 第66-67页 |
| ·肿瘤细胞总RNA 提取及定量 | 第67-68页 |
| ·肿瘤细胞总RNA 体外负载DC | 第68页 |
| ·转染后mDC 内CEA 蛋白表达 | 第68页 |
| ·SW480 总RNA 负载DC 后体外诱导CTL 及特异性细胞毒实验 | 第68-69页 |
| ·ELISA 法检测诱导的CTL IFN-γ分泌 | 第69页 |
| ·统计学方法 | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-73页 |
| ·转染SW480 总RNA 的DC 内CEA 蛋白表达 | 第69-70页 |
| ·转染肿瘤总RNA 的DC 诱导的肿瘤特异性细胞毒效应 | 第70-72页 |
| ·转染SW480 总RNA 的DC 诱导CTL 的IFN-γ分泌 | 第72-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-97页 |
| 附图 | 第97-99页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 中文摘要 | 第101-104页 |
| Abstract | 第104-107页 |
