| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·猪链球菌的血清型 | 第13-14页 |
| ·猪链球菌的分离与鉴定 | 第14-16页 |
| ·微生物形态学与生化鉴定 | 第14页 |
| ·血清学鉴定 | 第14-15页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第15-16页 |
| ·猪链球菌的毒力因子 | 第16-17页 |
| ·致病机理 | 第17-18页 |
| ·铁与链球菌 | 第18-20页 |
| ·铁元素为猪链球菌生长繁殖所必需 | 第18-19页 |
| ·猪链球菌铁吸收转运与调节系统 | 第19-20页 |
| ·金属依赖转录调节蛋白MtsR基因功能研究 | 第20-21页 |
| ·课题研究目的与内容 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 猪链球菌的分离鉴定 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·菌种 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·溶液配制 | 第23-24页 |
| ·试剂盒 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·菌种分离 | 第24页 |
| ·革兰氏染色法 | 第24-25页 |
| ·溶血性实验 | 第25页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·细菌16S rDNA菌种鉴定 | 第26-27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-30页 |
| ·菌落和菌体特征 | 第27-28页 |
| ·溶血性试验结果 | 第28-29页 |
| ·基因组DNA及16SrDNA基因PCR扩增产物 | 第29页 |
| ·16SrDNA序列比对分析 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 猪链球菌毒力相关因子检测 | 第31-35页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验菌种 | 第31页 |
| ·所需培养基 | 第31页 |
| ·实验所需试剂盒及溶液 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-33页 |
| ·引物的设计和合成 | 第31-32页 |
| ·毒力相关因子的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 | 第33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第4章 猪链球菌与铁元素的关系研究 | 第35-40页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·菌种 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·溶液配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·金属螯合剂DPD对猪链球菌生长影响实验 | 第36页 |
| ·Fe2+对猪链球菌生长影响实验 | 第36页 |
| ·Fe3+对猪链球菌生长影响实验 | 第36页 |
| ·血红蛋白对猪链球菌生长影响实验 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-39页 |
| ·DPD对猪链球菌生长影响结果分析 | 第37页 |
| ·Fe2+对猪链球菌生长影响结果分析 | 第37-38页 |
| ·Fe3+对猪链球菌生长影响结果分析 | 第38页 |
| ·血红蛋白对猪链球菌生长影响结果分析 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第五章 猪链球菌铁依赖转录调节基因功能初步研究 | 第40-62页 |
| ·材料 | 第40-42页 |
| ·菌株与质粒 | 第40-41页 |
| ·培养基 | 第41页 |
| ·试剂,酶和所需试剂盒 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-53页 |
| ·生物信息学分析猪链球菌 | 第42页 |
| ·猪链球菌基因组DNA的提取 | 第42页 |
| ·DH5α感受态的制备 | 第42页 |
| ·猪链球菌感受态细胞的制作 | 第42-43页 |
| ·mtsR基因缺失突变株的构建 | 第43-48页 |
| ·mtsR基因缺失突变株的筛选和确定 | 第48-49页 |
| ·猪链球菌RNA的提取 | 第49-51页 |
| ·RT-PCR检测铁吸收相关关键基因表达 | 第51-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-61页 |
| ·猪链球菌生物信息学分析结果 | 第53-54页 |
| ·Mts基因载体pJR700-Mts质粒PXL34的构建与鉴定 | 第54-56页 |
| ·mtsR缺失载体质粒PXL35的构建与鉴定 | 第56-58页 |
| ·PCR确定mstR基因缺失 | 第58-59页 |
| ·RT-PCR检测野生株和缺失株金属离子绑定和调节基因表达差异 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第70页 |