| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 符号说明 | 第16-17页 |
| 本文关键基因功能简介 | 第17-19页 |
| 第一章 前言 | 第19-47页 |
| ·活性氧自由基与DNA损伤反应修复体系 | 第20-38页 |
| ·活性氧自由基的概念、性质及产生途径 | 第20-21页 |
| ·活性氧自由基与DNA损伤 | 第21-22页 |
| ·DNA损伤反应修复体系 | 第22-38页 |
| ·抗氧化体系 | 第23-25页 |
| ·DNA损伤修复体系 | 第25-30页 |
| ·DNA损伤检验点体系 | 第30-38页 |
| ·细胞衰老 | 第38-44页 |
| ·重金属诱导的细胞氧化胁迫及DNA氧化损伤监测 | 第44-45页 |
| ·论文的研究意义及主要内容 | 第45-47页 |
| 第二章 DNA损伤反应修复途径与基因组DNA氧化损伤 | 第47-64页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·酵母菌株、培养基及培养条件 | 第47-49页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第49-50页 |
| ·菌种的保存 | 第50页 |
| ·PCR反应 | 第50页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳、PCR产物纯化、质粒提取及凝胶回收 | 第50页 |
| ·酿酒酵母完整细胞转化法 | 第50-51页 |
| ·酵母染色体的提取 | 第51-52页 |
| ·基因敲除 | 第52-53页 |
| ·点突变频率的测定 | 第53页 |
| ·H_2O_2敏感性的测定 | 第53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-62页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系基因敲除菌株的构建 | 第53-56页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系基因缺失菌株基因组稳定性的测定 | 第56-58页 |
| ·DNA损伤反应修复体系基因缺失菌对不同浓度双氧水敏感性的测定 | 第58-62页 |
| ·本章小结 | 第62-64页 |
| 第三章 DNA氧化损伤反应修复体系与酿酒酵母实足寿命 | 第64-80页 |
| ·引言 | 第64-65页 |
| ·材料与方法 | 第65-68页 |
| ·菌株及培养基 | 第65-66页 |
| ·实足寿命的测定 | 第66-67页 |
| ·检测细胞完整性的显微镜观察 | 第67页 |
| ·检测细胞膜完整性的碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染色 | 第67页 |
| ·检测细胞代谢活性的Fun1染色 | 第67-68页 |
| ·实验结果与讨论 | 第68-78页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系相关基因的缺失导致细胞实足寿命缩短 | 第68-74页 |
| ·衰老过程中酵母细胞形态的表征 | 第74-76页 |
| ·在衰老过程中酿酒酵母细胞代谢活性的表征 | 第76-78页 |
| ·本章小结 | 第78-80页 |
| 第四章 DNA氧化损伤反应修复体系对细胞实足寿命影响机制的探讨 | 第80-102页 |
| ·引言 | 第80-81页 |
| ·材料与方法 | 第81-84页 |
| ·菌株及培养基 | 第81-83页 |
| ·细胞ROS水平测定 | 第83页 |
| ·细胞突变频率的测定 | 第83页 |
| ·细胞壁对SDS和lysing enzyme敏感性的测定 | 第83-84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-100页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系相关基因缺失菌株胞内ROS的测定 | 第84-87页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系相关基因缺失菌株与自发突变累积 | 第87-89页 |
| ·DNA氧化损伤反应修复体系相关基因缺失菌株细胞壁对SDS和lysing enzyme的敏感性测定 | 第89-97页 |
| ·外源ROS加速细胞壁表型异常及细胞衰老 | 第97-100页 |
| ·本章小结 | 第100-102页 |
| 第五章 重金属诱导的细胞氧化胁迫及DNA氧化损伤监测 | 第102-115页 |
| ·引言 | 第102-103页 |
| ·材料与方法 | 第103-104页 |
| ·酵母菌株、培养基及培养条件 | 第103页 |
| ·质粒构建 | 第103页 |
| ·酵母转化 | 第103-104页 |
| ·GFP荧光观察 | 第104页 |
| ·细胞悬液的荧光扫描 | 第104页 |
| ·细胞突变频率及存活率的测定 | 第104页 |
| ·实验结果与讨论 | 第104-114页 |
| ·roGFP1-R12在酵母细胞内的表达 | 第104-105页 |
| ·roGFP1-R12在酵母细胞内的氧化和还原 | 第105-107页 |
| ·表达roGFP1-R12的酵母细胞对重金属的氧化还原反应 | 第107-110页 |
| ·重金属导致的DNA突变 | 第110-114页 |
| ·本章小结 | 第114-115页 |
| 全文总结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-128页 |
| 致谢 | 第128-130页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第130-131页 |
| 外文写作一 | 第131-147页 |
| 外文写作二 | 第147-167页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第167页 |
