| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩写词表 | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-27页 |
| 1 前言 | 第7-9页 |
| 2 植物AsA合成途径的研究 | 第9-20页 |
| ·植物AsA的生物合成途径的阐明 | 第9-15页 |
| ·编码植物AsA合成途径中各反应催化酶的基因的克隆和功能研究 | 第15-20页 |
| 3 植物体内AsA的分解代谢和循环再生的研究 | 第20-24页 |
| ·植物体内AsA的分解代谢和循环再生途径 | 第20-23页 |
| ·植物体内AsA的分解代谢和循环再生途径相关基因的克隆和功能研究 | 第23-24页 |
| 4. 植物提高AsA产量代谢工程 | 第24-25页 |
| 5 结论和展望 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| 1 材料 | 第27-30页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·酶与试剂盒 | 第27-28页 |
| ·细菌和植物培养基 | 第28页 |
| ·抗生素配制 | 第28-29页 |
| ·引物合成与测序 | 第29页 |
| ·蛋白质电泳试剂 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-42页 |
| ·编码拟南芥Vc代谢途径中酶的基因的获得 | 第30-31页 |
| ·载体构建方法 | 第31-33页 |
| ·农杆菌培养与转化 | 第33-34页 |
| ·拟南芥的培养与转化 | 第34-36页 |
| ·转基因拟南芥的分子检测 | 第36-40页 |
| ·转基因拟南芥Vc含量的测定 | 第40-42页 |
| 第三章 Vc合成途径基因在拟南芥中过量表达 | 第42-61页 |
| 1 实验路线与方法 | 第42-45页 |
| ·拟南芥Vc合成途径基因的克隆和植物表达载体构建 | 第42-43页 |
| ·拟南芥的转化和阳性植株的获得 | 第43-44页 |
| ·转基因拟南芥中基因表达量的分析 | 第44-45页 |
| ·HPLC测定转基因拟南芥 Vc含量 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-59页 |
| ·拟南芥 Vc合成途径基因的克隆 | 第45页 |
| ·拟南芥 Vc合成途径基因植物表达载体的构建 | 第45页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第45-51页 |
| ·编码AsA生物合成途径中酶的基因在转基因植株中表达量的分析 | 第51-52页 |
| ·各拟南芥转基因株系AsA含量的测定 | 第52-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 维生素C分解代谢途径基因ao的RNAi抑制 | 第61-71页 |
| 1 实验路线与方法 | 第61-63页 |
| ·ao基因片段的克隆和构建RNAi抑制表达载体 | 第61-62页 |
| ·拟南芥的转化 | 第62页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第62页 |
| ·转基因植株中ao表达量的分析 | 第62-63页 |
| ·HPLC测定Vc含量 | 第63页 |
| 2 结果 | 第63-69页 |
| ·ao基因RNAi片断的克隆 | 第63-64页 |
| ·构建pHB-SAO-GUS-AAO植物表达载体 | 第64-66页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第66-67页 |
| ·ao基因表达量的分析 | 第67页 |
| ·Vc含量的测定 | 第67-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 过表达Vc再生途径基因dhar | 第71-80页 |
| 1 实验路线与方法 | 第71-73页 |
| ·脱氢抗坏血酸还原酶基因(dhar)的克隆和载体构建 | 第71-72页 |
| ·拟南芥的转化和阳性植株的获得 | 第72页 |
| ·HPLC测定转基因拟南芥 Vc含量 | 第72页 |
| ·转基因拟南芥中基因表达量的分析 | 第72-73页 |
| 2 结果 | 第73-78页 |
| ·拟南芥dhar基因的克隆 | 第73-74页 |
| ·拟南芥dhar基因植物表达载体的构建 | 第74-75页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第75-76页 |
| ·dhar基因在转基因拟南芥中的表达量分析 | 第76-77页 |
| ·dhar转基因株系AsA含量的测定 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 第六章 总结与展望 | 第80-83页 |
| 1 研究总结 | 第80-81页 |
| 2 本研究的创新点 | 第81页 |
| 3 展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 附录 | 第91-93页 |
| 攻读博士学位期间发表论文情况 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
