| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-15页 |
| 前言 | 第15-21页 |
| 1.动脉粥样硬化及其相关的心脑血管疾病严重危害人类健康 | 第15页 |
| 2.动脉粥样硬化发生是一个多因素作用的复杂病理过程 | 第15-18页 |
| ·动脉粥样硬化的病理特征 | 第15-16页 |
| ·动脉粥样硬化发病机制的多种学说 | 第16-18页 |
| ·脂质代谢紊乱学说 | 第16页 |
| ·内皮损伤学说 | 第16-17页 |
| ·炎症反应学说 | 第17页 |
| ·动脉粥样硬化是一个多因素作用的复杂病变过程 | 第17-18页 |
| 3.动脉粥样硬化动物模型的现状及存在的问题 | 第18页 |
| 4.豚鼠脂代谢的生理特点和病理特征 | 第18-21页 |
| 实验材料 | 第21-25页 |
| 1.实验动物 | 第21页 |
| 2.饲料 | 第21页 |
| 3.试剂及配置 | 第21-24页 |
| ·主要试剂 | 第21-23页 |
| ·主要试剂配制 | 第23-24页 |
| 4.主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 实验方法 | 第25-38页 |
| 1.动物分组及模型建立 | 第25页 |
| 2.观察和检测指标 | 第25-38页 |
| ·一般观察 | 第25页 |
| ·脂质测定 | 第25-26页 |
| ·血清脂质测定 | 第25页 |
| ·肝脏脂质测定 | 第25-26页 |
| ·酶联免疫吸附法测定血清CETP、LCAT、HDL_2、HDL_3、hs-CRP、Ox-LDL水平 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第26-30页 |
| ·目的基因的选择 | 第26-27页 |
| ·实验试剂和耗材处理 | 第27页 |
| ·肝脏RNA提取 | 第27页 |
| ·RNA纯度、浓度检测 | 第27-28页 |
| ·目的基因引物的设计与合成 | 第28页 |
| ·逆转录PCR(RT-PCR) | 第28-29页 |
| ·Real-Time PCR | 第29-30页 |
| ·标准曲线的制作 | 第30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第30页 |
| ·豚鼠SR-BI基因表达片段的克隆测序 | 第30-32页 |
| ·PCR产物回收纯化 | 第30-31页 |
| ·SR-BI基因与pUCm-T Vector的连接 | 第31-32页 |
| ·转化 | 第32页 |
| ·筛选 | 第32页 |
| ·豚鼠SR-BI基因序列分析 | 第32页 |
| ·动脉粥样硬化病理形态学观察 | 第32-36页 |
| ·动脉标本取材 | 第32页 |
| ·石蜡包埋切片制作法 | 第32-33页 |
| ·苏木素—伊红(HE)染色及结果判定 | 第33-35页 |
| ·Masson染色 | 第35页 |
| ·苏丹IV染色 | 第35-36页 |
| ·动脉粥样硬化分期 | 第36页 |
| ·免疫组化 | 第36-38页 |
| ·免疫组化操作过程 | 第36-37页 |
| ·免疫组化切片观察和结果分析 | 第37-38页 |
| 实验结果 | 第38-57页 |
| 1.一般观察 | 第38-39页 |
| 2.血清脂质变化 | 第39-41页 |
| ·血清TC | 第39页 |
| ·血清TG | 第39页 |
| ·血清LDL-C | 第39页 |
| ·血浆脂蛋白组成 | 第39页 |
| ·血清HDL-C、HDL_3/HDL_2比值 | 第39-41页 |
| 3.肝脏脂质的变化 | 第41-43页 |
| 4.血清CETP、LCAT、OX-LDL、HS-CRP含量变化 | 第43-45页 |
| ·血清CETP | 第43页 |
| ·血清LCAT | 第43页 |
| ·血清Ox-LDL | 第43-44页 |
| ·血清hs-CRP | 第44-45页 |
| 5.主动脉病理形态学变化 | 第45-49页 |
| ·主动脉动脉粥样斑块苏丹IV染色 | 第45-46页 |
| ·HE染色结果 | 第46-48页 |
| ·Masson染色结果(主动脉纤维增生面积比变化) | 第48-49页 |
| 6.主动脉ICAM-1、CD36和ABCA1蛋白表达变化 | 第49-53页 |
| ·主动脉ICAM-1蛋白表达 | 第49页 |
| ·主动脉CD36蛋白表达 | 第49-50页 |
| ·主动脉ABCA1蛋白表达 | 第50-53页 |
| 7.肝脏LCAT、LDL-R、PPARA和SR-BI MRNA表达变化 | 第53-57页 |
| ·PCR扩增特异性 | 第53-54页 |
| ·肝脏LCAT、LDL-R、PPARα、SR-BI基因表达变化 | 第54-56页 |
| ·豚鼠SR-BI序列分析 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-71页 |
| 1.脂代谢紊乱 | 第57页 |
| 2.动脉粥样硬化病变形成 | 第57-58页 |
| 3.LDL-C代谢异常促进AS形成 | 第58-62页 |
| ·高血浆LDL-C/HDL-C比值 | 第58页 |
| ·CETP活性增高促进动脉粥样硬化形成 | 第58-59页 |
| ·高Ox-LDL浓度促进泡沫细胞形成 | 第59-60页 |
| ·CD36介导的Ox-LDL吞噬作用增强 | 第60-61页 |
| ·正常的LDL-C代谢途径受阻 | 第61-62页 |
| 4.HDL亚型的变化促进动脉粥样硬化发生 | 第62-66页 |
| ·HDL_3/HDL_2比值升高 | 第62-63页 |
| ·LCAT表达下降抑制HDL成熟 | 第63页 |
| ·CETP促进小颗粒HDL_3增多 | 第63-64页 |
| ·高脂饮食引起豚鼠血浆HDL-C、肝脏SR-BI和动脉ABCA1表达代偿性升高 | 第64-66页 |
| 5.炎性因子表达促进动脉粥样硬化形成 | 第66-67页 |
| ·粘附分子表达增加和促进炎性细胞聚集 | 第66-67页 |
| ·hs-CRP预测动脉粥样硬化的发生 | 第67页 |
| 6.PPARA参与调节动脉粥样硬化的发生发展 | 第67-68页 |
| 7.SR-BI克隆的意义 | 第68-69页 |
| 8.豚鼠动脉粥样硬化模型的优点 | 第69-70页 |
| 9.本研究的不足及进一步设想 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| REVIEW | 第81-95页 |
| 附录一 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
