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牦牛RPS5基因的克隆与原核表达

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
论文部分缩写词的中英文对照第11-12页
第一章 核糖体蛋白和核糖体蛋白 55 的概况第12-20页
   ·核糖体蛋白概述第12页
   ·核糖体蛋白起源第12-13页
   ·核糖体蛋白基因与核糖体蛋白第13-14页
   ·核糖体蛋白的作用第14-15页
   ·RPS5 基因的研究进展第15页
   ·RPS5 基因的鉴定与分子结构第15-17页
     ·R P55 基因的功能第17-20页
     ·RPS5 与蛋白质的翻译第17页
     ·RPS5 具有DNA 连接蛋白Ⅱ的功能第17-18页
     ·RPS5 基因具有转录延伸因子-3(EF-3) 的功能第18页
     ·RPS5 基因与物种进化第18-20页
第二章 牦牛及牦牛 RPS5 基因概况第20-24页
   ·牦牛的经济价值第20页
   ·牦牛毛的特点与性能第20-21页
   ·调控牦牛毛生长的经济意义第21页
   ·RPS5 基因作用与牦牛毛相关功能第21-23页
     ·RPS5 基因对皮肤损伤的消炎和修复作用第21-22页
     ·核糖体蛋白 S5 (RPS5) 基因突变体的研究第22-23页
   ·牦牛RPS5 基因研究的目的和意义第23-24页
第三章 牦牛 RPS5 基因的克隆第24-41页
   ·实验材料第24-26页
     ·动物组织、载体及菌株第24页
     ·引物设计第24页
     ·试剂第24页
     ·主要的实验仪器和器械第24-25页
     ·溶液配制第25-26页
   ·实验方法第26-32页
     ·牦牛肝脏总 RNA 的提取第26-27页
     ·牦牛肝脏总RNA 反转录第27-28页
     ·扩增、回收目的基因第28-29页
     ·重组质粒pMD18-T/Rsp5 的构建第29页
     ·重组质粒的鉴定和测序第29-32页
   ·结果与分析第32-39页
     ·RNA 的检测第32页
     ·RT-PCR 产物第32页
     ·重组质粒的PCR 鉴定和酶切鉴定第32-33页
     ·序列分析第33-34页
     ·氨基酸组成分析第34-35页
     ·疏水性分析第35页
     ·信号肽分析第35-36页
     ·亚细胞定位预测第36页
     ·蛋白质二级结构和三级结构预测第36-37页
     ·序列比对第37-38页
     ·系统发育分析第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-41页
第四章 牦牛 RPS5 基因的原核表达第41-50页
   ·实验材料第41-42页
     ·载体和菌株第41页
     ·引物设计第41页
     ·试剂第41页
     ·溶液配制第41-42页
   ·实验方法第42-47页
     ·扩增带酶切位点的RPS5 编码区第42页
     ·回收扩增产物第42-43页
     ·获得pet28a 表达载体第43页
     ·酶切带有酶切位点的RPS5 基因和pet28a 表达载体第43-44页
     ·连接pet28a 载体和RPS5 基因第44页
     ·转化pet28a第44页
     ·pet28a/RPS5 重组子的鉴定第44-45页
     ·RPS5 蛋白的诱导表达第45-47页
   ·结果与分析第47-48页
     ·pet28a/RPS5 重组子的鉴定第47页
     ·牦牛RPS5 蛋白的SDS-PAGE 分析第47-48页
   ·讨论第48-49页
     ·融合蛋白的鉴定及表达条件优化第48-49页
     ·pet28a 表达载体的选择第49页
   ·小结第49-50页
结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55页

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