摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-29页 |
第一章 猪链球菌和噬菌体裂解作用的研究进展 | 第11-29页 |
1 猪链球菌的研究概况 | 第11-17页 |
·流行病学 | 第12-14页 |
·致病机理 | 第14-16页 |
·耐药性的研究 | 第16-17页 |
2 噬菌体的裂解作用 | 第17-22页 |
·噬菌体裂解作用的首要原理 | 第17-18页 |
·噬菌体裂解酶研究进展 | 第18-20页 |
·噬菌体穿孔素研究进展 | 第20-22页 |
3 本文的研究目的及意义 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-29页 |
第二篇 实验研究 | 第29-71页 |
第二章 噬菌体HolSMP的表达与纯化 | 第29-45页 |
1 材料与方法 | 第30-38页 |
·材料 | 第30-31页 |
·宿主菌和噬菌体的培养 | 第31页 |
·基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
·目的基因的扩增 | 第32-33页 |
·质粒pET-28a(+)的提取及双酶切 | 第33-34页 |
·原核表达载体holin-pET28a的构建 | 第34-36页 |
·holin融合蛋白的诱导表达 | 第36页 |
·SDS-PAGE分析 | 第36-37页 |
·holin蛋白的纯化 | 第37-38页 |
2 结果 | 第38-40页 |
·holin基因的克隆 | 第38页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第38页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第38-39页 |
·蛋白表达产物鉴定 | 第39页 |
·蛋白纯化 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
第三章 穿孔素HolSMP的生物学特性 | 第45-59页 |
1 材料与方法 | 第46-49页 |
·菌株和质粒 | 第46页 |
·主要酶和试剂 | 第46页 |
·裂解酶的表达和纯化 | 第46-48页 |
·裂解细菌实验 | 第48-49页 |
·HolSMP的生物信息学分析 | 第49页 |
·最佳还原剂浓度的测定 | 第49页 |
·最佳pH和温度的确定 | 第49页 |
2 结果 | 第49-55页 |
·LySMP的表达 | 第49-51页 |
·裂菌谱测定 | 第51-53页 |
·LySMP生物信息学分析 | 第53页 |
·HolSMP最适还原剂浓度的测定 | 第53-54页 |
·HolSMP最适pH和温度的测定 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
第四章 穿孔素HolSMP对斑马鱼抗猪链球菌抗感染研究 | 第59-71页 |
1 材料与方法 | 第60-63页 |
·菌株 | 第60-61页 |
·斑马鱼 | 第61页 |
·斑马鱼半数致死量(LD50)的测定 | 第61页 |
·HolSMP及其联合LySMP对HA9801的抗感染效果 | 第61-62页 |
·试验斑马鱼中细菌的残留情况分析 | 第62页 |
·HolSMP及其联合LySMP对SS2-H,SS2-4,SH040817,SH040805的抗感染试验 | 第62-63页 |
2 结果 | 第63-66页 |
·链球菌攻击后斑马鱼的临床与病理 | 第63页 |
·半数致死量LD50的计算 | 第63-64页 |
·HolSMP及其LySMP对HA9801的抗感染效果 | 第64页 |
·试验鱼中残留细菌的检测与鉴定 | 第64-65页 |
·LySMP对SS2-4,SS2-H,SH040805,SH040817的治疗效果 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |