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猪链球菌噬菌体穿孔素(holin)的表达及生物学活性研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
第一篇 文献综述第11-29页
 第一章 猪链球菌和噬菌体裂解作用的研究进展第11-29页
  1 猪链球菌的研究概况第11-17页
   ·流行病学第12-14页
   ·致病机理第14-16页
   ·耐药性的研究第16-17页
  2 噬菌体的裂解作用第17-22页
   ·噬菌体裂解作用的首要原理第17-18页
   ·噬菌体裂解酶研究进展第18-20页
   ·噬菌体穿孔素研究进展第20-22页
  3 本文的研究目的及意义第22-23页
  参考文献第23-29页
第二篇 实验研究第29-71页
 第二章 噬菌体HolSMP的表达与纯化第29-45页
  1 材料与方法第30-38页
   ·材料第30-31页
   ·宿主菌和噬菌体的培养第31页
   ·基因组DNA的提取第31-32页
   ·目的基因的扩增第32-33页
   ·质粒pET-28a(+)的提取及双酶切第33-34页
   ·原核表达载体holin-pET28a的构建第34-36页
   ·holin融合蛋白的诱导表达第36页
   ·SDS-PAGE分析第36-37页
   ·holin蛋白的纯化第37-38页
  2 结果第38-40页
   ·holin基因的克隆第38页
   ·重组质粒的酶切鉴定第38页
   ·重组质粒的测序鉴定第38-39页
   ·蛋白表达产物鉴定第39页
   ·蛋白纯化第39-40页
  3 讨论第40-42页
  参考文献第42-45页
 第三章 穿孔素HolSMP的生物学特性第45-59页
  1 材料与方法第46-49页
   ·菌株和质粒第46页
   ·主要酶和试剂第46页
   ·裂解酶的表达和纯化第46-48页
   ·裂解细菌实验第48-49页
   ·HolSMP的生物信息学分析第49页
   ·最佳还原剂浓度的测定第49页
   ·最佳pH和温度的确定第49页
  2 结果第49-55页
   ·LySMP的表达第49-51页
   ·裂菌谱测定第51-53页
   ·LySMP生物信息学分析第53页
   ·HolSMP最适还原剂浓度的测定第53-54页
   ·HolSMP最适pH和温度的测定第54-55页
  3 讨论第55-57页
  参考文献第57-59页
 第四章 穿孔素HolSMP对斑马鱼抗猪链球菌抗感染研究第59-71页
  1 材料与方法第60-63页
   ·菌株第60-61页
   ·斑马鱼第61页
   ·斑马鱼半数致死量(LD50)的测定第61页
   ·HolSMP及其联合LySMP对HA9801的抗感染效果第61-62页
   ·试验斑马鱼中细菌的残留情况分析第62页
   ·HolSMP及其联合LySMP对SS2-H,SS2-4,SH040817,SH040805的抗感染试验第62-63页
  2 结果第63-66页
   ·链球菌攻击后斑马鱼的临床与病理第63页
   ·半数致死量LD50的计算第63-64页
   ·HolSMP及其LySMP对HA9801的抗感染效果第64页
   ·试验鱼中残留细菌的检测与鉴定第64-65页
   ·LySMP对SS2-4,SS2-H,SH040805,SH040817的治疗效果第65-66页
  3 讨论第66-68页
  参考文献第68-71页
全文总结第71-73页
致谢第73页

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