| 缩略语 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一节 材料与方法 | 第14-28页 |
| 1.实验材料 | 第14-16页 |
| 1.1 细胞系 | 第14页 |
| 1.2 试剂 | 第14页 |
| 1.3 抗体 | 第14页 |
| 1.4 药物 | 第14-15页 |
| 1.5 仪器和设备 | 第15页 |
| 1.6 引物序列 | 第15-16页 |
| 2.实验方法 | 第16-28页 |
| 2.1 Western Blot 分析T-ALL细胞系中WEE1的蛋白水平 | 第16-17页 |
| 2.2 细胞增殖毒性检测实验(CCK-8法) | 第17-18页 |
| 2.3 凋亡检测(Annexin V/PI法) | 第18-19页 |
| 2.4 mRNA水平检测(Real-time qPCR) | 第19-21页 |
| 2.5 shWEE1质粒构建、病毒包装和稳定细胞株的构建 | 第21-25页 |
| 2.6 染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation) | 第25-28页 |
| 第二节 实验结果 | 第28-40页 |
| 1.T-ALL中WEE1高表达 | 第28-29页 |
| 1.1 原代病人样本分析T-ALL中WEE1高表达 | 第28页 |
| 1.2 West blot实验验证T-ALL中WEE1高表达 | 第28-29页 |
| 2.抑制WEE1的功能可降低T-ALL细胞的活性阻滞T-ALL的生长 | 第29-32页 |
| 2.1 WEE1抑制剂MK1775可抑制T-ALL细胞的活力 | 第29-30页 |
| 2.2 T-ALL中沉默WEE1明显减缓细胞生长 | 第30-32页 |
| 3.WEE1 抑制T-ALL细胞的生长是通过下调周期相关蛋白P-CDC2及c-MYC来实现的 | 第32页 |
| 4.c-MYC调控WEE1的转录 | 第32-35页 |
| 4.1 ChIP-seq数据分析c-MYC结合到WEE1的启动子区域 | 第32-33页 |
| 4.2 JQ1处理T-ALL细胞后c-MYC和WEE1下调 | 第33-34页 |
| 4.3 c-MYC沉默下调WEE1的表达 | 第34页 |
| 4.4 ChIP-seq数据分析c-MYC结合到WEE1的启动子区域 | 第34-35页 |
| 5.JQ1与MK1775联用无协同杀伤T-ALL效应 | 第35-36页 |
| 6.在T-ALL细胞中GLS1抑制剂可与WEE1抑制剂产生协同作用…… | 第36-37页 |
| 7.GLS1与WEE1抑制剂协同引起DNA损伤增加促使凋亡增多 | 第37-38页 |
| 8.相同的给药剂量和给药时间，T-ALL细胞株对WEE1的抑制剂MK1775更敏感，而对正常外周血单核粒细胞几乎无影响 | 第38-40页 |
| 第三节 讨论 | 第40-42页 |
| 第四节 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 综述 | 第50-75页 |
| 参考文献 | 第62-75页 |
| 发表文章 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
