| 摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 脑心肌炎(EMC)的流行病学 | 第14-15页 |
| 1.1.1 EMC国内外流行特点及危害 | 第14-15页 |
| 1.1.2 传染源、传播途径和宿主 | 第15页 |
| 1.2 脑心肌炎病毒(EMCV)的病原学特性 | 第15-16页 |
| 1.2.1 EMCV的起源与分类 | 第15-16页 |
| 1.2.2 EMCV的形态结构及其培养特性 | 第16页 |
| 1.2.3 EMCV的理化特性 | 第16页 |
| 1.3 EMCV的分子生物学特征 | 第16-18页 |
| 1.3.1 EMCV的基因组结构 | 第16-17页 |
| 1.3.2 EMCV的各个基因及特征 | 第17-18页 |
| 1.4 EMC的病理变化 | 第18-20页 |
| 1.4.1 EMCV的致病机理 | 第18-19页 |
| 1.4.2 临床症状及病理变化 | 第19-20页 |
| 1.5 EMC的诊断与防治 | 第20-21页 |
| 1.5.1 EMC的诊断 | 第20-21页 |
| 1.5.2 EMC的防治 | 第21页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 病料来源 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株与载体 | 第23页 |
| 2.1.3 细胞与实验动物 | 第23页 |
| 2.1.4 主要实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 实验试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.1.6 实验设备与仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.7 实验所用到的鉴定引物 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 疑似病料的处理 | 第25页 |
| 2.2.2 病料处理液在BHK-21细胞上的盲传 | 第25-26页 |
| 2.2.3 EMCV分离株的RT-PCR鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 病毒粒子透射电镜观察 | 第27页 |
| 2.2.5 EMCV分离株的生长特性研究 | 第27-28页 |
| 2.2.6 EMCV分离株全基因组片段的RT-PCR分段扩增 | 第28页 |
| 2.2.7 RACE法获取EMCV5’末端 | 第28-30页 |
| 2.2.8 目的基因的克隆及序列测定 | 第30-31页 |
| 2.2.9 EMCV全基因组序列的生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2.2.10 EMCVVP1蛋白结构分析 | 第32-33页 |
| 2.3 EMCV分离株全病毒多克隆抗体的制备 | 第33-35页 |
| 2.3.1 病毒的浓缩纯化 | 第33页 |
| 2.3.2 动物免疫 | 第33页 |
| 2.3.3 间接ELISA检测多抗血清效价 | 第33-34页 |
| 2.3.4 多克隆抗体间接免疫荧光(IFA)检测 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-55页 |
| 3.1 EMCV分离株的分离及鉴定 | 第35-37页 |
| 3.1.1 病毒盲传及CPE观察 | 第35-36页 |
| 3.1.2 RT-PCR鉴定 | 第36页 |
| 3.1.3 EMCVHLJ株的电镜观察 | 第36页 |
| 3.1.4 EMCVHLJ株的生长特性 | 第36-37页 |
| 3.2 全基因组RT-PCR分段扩增 | 第37-39页 |
| 3.2.1 EMCVHLJ株5’UTR的扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.2 EMCVHLJ株E2-E5片段的扩增 | 第38页 |
| 3.2.3 重组质粒的鉴定及序列测定 | 第38-39页 |
| 3.3 EMCVHLJ株的全基因组序列的生物信息学分析 | 第39-53页 |
| 3.3.1 全基因组序列的拼接 | 第39页 |
| 3.3.2 全基因组结构分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 基因组同源性分析 | 第40-46页 |
| 3.3.4 EMCVHLJ株的系统进化分析 | 第46-51页 |
| 3.3.5 EMCVVP1结构特性分析 | 第51-53页 |
| 3.4 EMCV全病毒多抗的制备 | 第53-55页 |
| 3.4.1 EMCV分离株的浓缩纯化 | 第53页 |
| 3.4.2 全病毒多抗的效价检测 | 第53页 |
| 3.4.3 EMCVHLJ株的间接免疫荧光检测 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| 4.1 EMCVHLJ株的分离鉴定 | 第55页 |
| 4.2 EMCVHLJ株全基因组的分段扩增 | 第55-56页 |
| 4.3 EMCVHLJ株生物信息学分析 | 第56-57页 |
| 4.4 EMCVHLJ株VP1蛋白结构特性分析 | 第57-58页 |
| 4.5 多抗制备及生物学特性 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |