| 个人简历 | 第3-9页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-18页 |
| 第一章 大黄酸衍生物4F抗肿瘤活性及调控RAC1蛋白的作用 | 第19-51页 |
| 前言 | 第19-20页 |
| 1 实验材料 | 第20-25页 |
| 1.1 细胞株 | 第20-21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21-23页 |
| 1.3 主要耗材及仪器设备 | 第23-24页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.1 细胞培养 | 第25-27页 |
| 2.2 分子对接 | 第27-28页 |
| 2.3 化合物4F合成 | 第28页 |
| 2.4 多功能酶标仪扫描大黄酸及4F吸收光和荧光光谱 | 第28页 |
| 2.5 激光共聚焦检测4F在细胞内的分布 | 第28-29页 |
| 2.6 荧光素酶报告基因实验检测Rac1启动子活性 | 第29-31页 |
| 2.7 CCK-8法检测细胞活力 | 第31-32页 |
| 2.8 Western Blot实验检测Rac1蛋白表达 | 第32-36页 |
| 2.9 统计学方法 | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-48页 |
| 3.1 4F结构及理化性质 | 第36-37页 |
| 3.2 RAC1蛋白与化合物分子对接结果 | 第37-41页 |
| 3.3 大黄酸及4F吸收光和荧光光谱 | 第41-42页 |
| 3.4 激光共聚焦检测4F细胞内分布结果 | 第42-43页 |
| 3.5 CCK-8 法测定4F抗肿瘤活性结果 | 第43-45页 |
| 3.6 WB检测Rac1蛋白表达水平结果 | 第45-47页 |
| 3.7 萤光素酶报告基因实验结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 第二章 大黄酸衍生物4F对乳腺癌MDA-MB-231及MCF-7 细胞功能的影响 | 第51-79页 |
| 前言 | 第51-52页 |
| 1 实验材料 | 第52-53页 |
| 1.1 细胞株 | 第52页 |
| 1.2 主要试剂 | 第52-53页 |
| 1.3 主要耗材及仪器设备 | 第53页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第53页 |
| 2 实验方法 | 第53-59页 |
| 2.1.CCK-8 检测细胞活力 | 第53-54页 |
| 2.2 平板克隆形成实验 | 第54页 |
| 2.3 细胞生长曲线 | 第54-55页 |
| 2.4 Hematoxylin-Eosin染色 | 第55页 |
| 2.5 Transwell迁移及侵袭实验 | 第55-56页 |
| 2.6 溶酶体及线粒体荧光探针标记细胞实验 | 第56-57页 |
| 2.7 细胞周期分布检测 | 第57页 |
| 2.8 细胞凋亡检测 | 第57页 |
| 2.9 F-actin染色观察细胞骨架改变 | 第57-58页 |
| 2.10 统计学方法 | 第58-59页 |
| 3 实验结果 | 第59-76页 |
| 3.1 CCK-8 法检测大黄酸及4F作用后细胞的抑制率及IC50值 | 第59-61页 |
| 3.2 细胞增殖实验结果 | 第61-64页 |
| 3.3 Transwell实验结果 | 第64-65页 |
| 3.4 细胞周期分布检测结果 | 第65-67页 |
| 3.5 细胞凋亡检测结果 | 第67-69页 |
| 3.6 HE染色结果 | 第69-70页 |
| 3.7 F-actin染色观察细胞骨架实验结果 | 第70-74页 |
| 3.8 溶酶体及线粒体荧光标记结果 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-79页 |
| 第三章 大黄酸衍生物4F调控乳腺癌MDA-MB-231 及MCF-7 细胞非凋亡程序性死亡机制研究 | 第79-107页 |
| 前言 | 第79-80页 |
| 1 实验材料 | 第80-81页 |
| 1.1 细胞株 | 第80页 |
| 1.2 主要试剂 | 第80-81页 |
| 1.3 主要耗材及仪器设备 | 第81页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第81页 |
| 2 实验方法 | 第81-86页 |
| 2.1.透射电子显微镜观察细胞亚显微结构 | 第81-82页 |
| 2.2 mRFP-GFP-LC3自噬双标病毒监测自噬流的形成 | 第82-85页 |
| 2.3 细胞免疫实验检测LC3蛋白定位及相对表达量 | 第85-86页 |
| 2.4 Western Blot实验检测凋亡、副凋亡和自噬相关蛋白表达 | 第86页 |
| 2.5 统计学方法 | 第86页 |
| 3 实验结果 | 第86-102页 |
| 3.1 透射电子显微镜观察细胞亚显微结构结果 | 第86-89页 |
| 3.2 WB检测凋亡蛋白表达水平 | 第89-90页 |
| 3.3 LC3蛋白定位及相对表达量 | 第90-92页 |
| 3.4 WB检测自噬蛋白表达水平 | 第92-97页 |
| 3.5 自噬双标mRFP-GFP-LC3 慢病毒监测自噬流结果 | 第97-99页 |
| 3.6 WB检测自噬Beclin-1、Grp78、LC3蛋白表达水平 | 第99-102页 |
| 4 讨论 | 第102-107页 |
| 不足与展望 | 第107-108页 |
| 全文小结 | 第108-109页 |
| 本研究创新之处 | 第109-110页 |
| 参考文献 | 第110-119页 |
| 综述 细胞自噬及其在乳腺癌治疗中的作用 | 第119-135页 |
| 参考文献 | 第128-135页 |
| 致谢 | 第135-137页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第137页 |
