个人简历 | 第3-6页 |
中英文缩写对照表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
前言 | 第16-19页 |
一 实验材料与方法 | 第19-47页 |
1实验材料 | 第19-23页 |
1.1 细胞系 | 第19页 |
1.2 主要实验耗材 | 第19页 |
1.3 主要实验试剂 | 第19-21页 |
1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
1.5 抗体 | 第22页 |
1.6 主要试剂及工作液的配制方法 | 第22-23页 |
2实验方法 | 第23-47页 |
2.1 细胞培养 | 第23-27页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第24页 |
2.1.2 细胞换液 | 第24-25页 |
2.1.3 细胞传代 | 第25页 |
2.1.4 细胞计数 | 第25-26页 |
2.1.5 细胞冻存 | 第26-27页 |
2.2 慢病毒稳定转染构建FBW7 低表达细胞系 | 第27-28页 |
2.3 脂质体瞬时转染法构建FBW7α高表达细胞系 | 第28-30页 |
2.4 细胞总RNA的提取 | 第30-31页 |
2.5 逆转录 | 第31-32页 |
2.6 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.7 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第33-34页 |
2.8 细胞总蛋白质提取 | 第34页 |
2.9 BCA法测定蛋白浓度 | 第34-36页 |
2.10 蛋白变性 | 第36页 |
2.11 Western Blot | 第36-40页 |
2.12 条件培养基收集(Condition mediun,CM) | 第40-41页 |
2.13 划痕实验 | 第41-42页 |
2.14 Transwell迁移实验 | 第42-43页 |
2.15 慢病毒转染技术构建稳定表达luciferase的 LLC细胞 | 第43-44页 |
2.16 Luciferase活性测定荧光素酶活性测定 | 第44页 |
2.17 动物实验 | 第44-46页 |
2.18 统计学分析 | 第46-47页 |
二 实验结果 | 第47-76页 |
三 讨论 | 第76-80页 |
四 全文总结 | 第80-81页 |
五 参考文献 | 第81-87页 |
综述 | 第87-103页 |
参考文献 | 第99-103页 |
致谢 | 第103-105页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第105页 |