| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 植物开花机理研究进展 | 第13-20页 |
| 1.1 植物开花的分子机制研究 | 第13-19页 |
| 1.1.1 光周期路径 | 第14-16页 |
| 1.1.2 春化路径 | 第16-17页 |
| 1.1.3 赤霉素路径 | 第17-18页 |
| 1.1.4 年龄路径 | 第18-19页 |
| 1.1.5 自主路径 | 第19页 |
| 1.2 菊花开花机理研究进展 | 第19-20页 |
| 2 BBXs转录因子家族 | 第20-26页 |
| 2.1 BBXs转录因子家族的分类 | 第21-24页 |
| 2.2 BBXs家族转录因子功能 | 第24-26页 |
| 3 实验意义 | 第26-27页 |
| 第二章 菊花CmBBX7基因的克隆及表达模式分析 | 第27-47页 |
| 1 材料与方法 | 第28-34页 |
| 1.1 植物材料及实验药品 | 第28页 |
| 1.2 试验方法 | 第28-34页 |
| 1.2.1 菊花花芽石蜡切片的制作 | 第28-29页 |
| 1.2.2 CmBBX7基因全长克隆 | 第29-30页 |
| 1.2.3 CmBBX7基因序列分析 | 第30页 |
| 1.2.4 CmBBX7及CmCO表达模式分析 | 第30-32页 |
| 1.2.5 CmBBX7基因分段及pGBKT7载体构建 | 第32-33页 |
| 1.2.6 转录激活活性验证 | 第33页 |
| 1.2.7 亚细胞定位 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-44页 |
| 2.1 菊花花芽石蜡切片最适染色方法的确定 | 第34页 |
| 2.2 转录组个取样时期花芽特征 | 第34-35页 |
| 2.3 菊花CmBBX7基因克隆 | 第35-36页 |
| 2.4 菊花CmBBX7与其他植物种类同源序列比对与进化树分析 | 第36-39页 |
| 2.5 菊花CmBBX7表达模式分析 | 第39-41页 |
| 2.6 CmBBX7转录激活活性验证 | 第41-42页 |
| 2.7 CmBBX7转录激活活性位点的确定 | 第42-43页 |
| 2.8 CmBBX7亚细胞定位 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 菊花CmBBX7调控开花的分子机理 | 第47-65页 |
| 1 材料与方法 | 第48-54页 |
| 1.1 实验材料及药品 | 第48页 |
| 1.2 试验方法 | 第48-54页 |
| 1.2.1 CmBBX7超表达载体的构建 | 第48页 |
| 1.2.2 农杆菌介导的花粉管通道法转化拟南芥 | 第48-49页 |
| 1.2.3 拟南芥播种及阳性植株筛选 | 第49页 |
| 1.2.4 拟南芥部分开花调控基因表达定量 | 第49-50页 |
| 1.2.5 农杆菌介导法转化切花菊'优香' | 第50页 |
| 1.2.6 CmCO基因分段及pGADT7载体构建 | 第50-51页 |
| 1.2.7 CmBBX7基因分段及pGBKT7载体构建 | 第51页 |
| 1.2.8 AtBBX7(B-boxes)和AtCO基因克隆及pBD、pAD载体构建 | 第51-52页 |
| 1.2.9 酵母双杂交实验 | 第52页 |
| 1.2.10 CmBBX7及CmCO洋葱BiFC载体构建 | 第52-53页 |
| 1.2.11 双分子荧光互补实验 | 第53页 |
| 1.2.12 烟草瞬时转化实验 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-63页 |
| 2.1 拟南芥阳性植株鉴定 | 第54页 |
| 2.2 转基因拟南芥表型统计 | 第54-55页 |
| 2.3 转基因拟南芥中部分开花调控基因的相对表达量 | 第55-56页 |
| 2.4 菊花转基因叶盘再生情况 | 第56页 |
| 2.5 CmBBX7与CmCO在酵母中的互作验证 | 第56-58页 |
| 2.6 双分子荧光互补实验 | 第58页 |
| 2.7 CmBBX7与CmCO互作位点的确定 | 第58-59页 |
| 2.8 AtBBX7和CmBBX7分别与AtCO在酵母中的互作验证 | 第59-60页 |
| 2.9 超表达CmCO异源转化拟南芥及回补拟南芥co突变体的表型 | 第60-61页 |
| 2.10 烟草瞬时转化实验 | 第61-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 全文结论 | 第65-67页 |
| 创新点 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 附录 | 第79-93页 |
| 附录一 RNA提取方法 | 第79-80页 |
| 附录二 RNA反转录制备cDNA模板 | 第80-81页 |
| 附录三 琼脂糖凝胶纯化步骤 | 第81-82页 |
| 附录四 连接转化步骤 | 第82-83页 |
| 附录五 CmBBX7、CmCO基因序列 | 第83-85页 |
| 附录六 WH4105感受态细胞的制备 | 第85-86页 |
| 附录七 酵母Y2H感受态细胞的转化 | 第86-88页 |
| 附录八 亚细胞定位和BiFC步骤 | 第88-89页 |
| 附录九 农杆菌蘸花法转化拟南芥 | 第89-91页 |
| 附录十 农杆菌介导法转化切花菊'优香' | 第91-93页 |
| 攻读学位期间发表论文及参与的科研项目 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
