| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-33页 |
| 1.1 辅酶再生的方法 | 第10-18页 |
| 1.1.1 全细胞法 | 第11-12页 |
| 1.1.2 光化学法 | 第12-13页 |
| 1.1.3 化学法 | 第13页 |
| 1.1.4 电化学法 | 第13-14页 |
| 1.1.5 均相催化再生法 | 第14-15页 |
| 1.1.6 多相催化再生法 | 第15页 |
| 1.1.7 酶法 | 第15-18页 |
| 1.2 甲酸脱氢酶的概述 | 第18-27页 |
| 1.2.1 甲酸脱氢酶的分布及发现 | 第18-19页 |
| 1.2.2 甲酸脱氢酶的分类及理化性质 | 第19-20页 |
| 1.2.3 甲酸脱氢酶的氨基酸序列 | 第20-22页 |
| 1.2.4 甲酸脱氢酶的三级结构 | 第22-26页 |
| 1.2.5 NAD(P)~+依赖型FDH主要的生产方法 | 第26-27页 |
| 1.3 蛋白质工程 | 第27-32页 |
| 1.3.1 FDH蛋白质工程主要方法 | 第27-28页 |
| 1.3.2 FDH蛋白质工程改造实例 | 第28-32页 |
| 1.4 本论文研究意义和研究内容 | 第32-33页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第32页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第32-33页 |
| 第二章 重组NADP~+依赖型FDH的表达及酶学性质 | 第33-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第36-38页 |
| 2.1.1 引物 | 第36页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第36-37页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第37页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.1.5 培养基 | 第38页 |
| 2.2 实验部分 | 第38-42页 |
| 2.2.1 重组质粒pET-17b-FDH的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.2 菌种的活化与保存 | 第39页 |
| 2.2.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第39页 |
| 2.2.4 转化 | 第39页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
| 2.2.6 重组菌生长曲线的测定 | 第40页 |
| 2.2.7 产酶条件的优化 | 第40-41页 |
| 2.2.8 重组菌pET-17b-FDH酶学性质的研究 | 第41-42页 |
| 2.2.9 重组菌pET-17b-FDH的酶活测定 | 第42页 |
| 2.3 结果与分析 | 第42-50页 |
| 2.3.1 生长曲线 | 第42-43页 |
| 2.3.2 产酶条件的优化 | 第43-44页 |
| 2.3.3 重组FDH在大肠杆菌中的高效表达及优化 | 第44-47页 |
| 2.3.4 重组菌pET-17b-FDH酶学性质 | 第47-49页 |
| 2.3.5 重组菌pET-17b-FDH全细胞与粗酶液酶活比较 | 第49-50页 |
| 2.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第三章 野生型NADP~+依赖型FDH的筛选和鉴定 | 第51-60页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第52页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第52-53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-57页 |
| 3.2.1 样本的采集和处理 | 第53页 |
| 3.2.2 培养基和生长条件 | 第53-54页 |
| 3.2.3 菌株的分离和纯化 | 第54-55页 |
| 3.2.4 BCC菌的表型鉴定 | 第55页 |
| 3.2.5 NADP~+依赖型FDH的筛选 | 第55-56页 |
| 3.2.6 NADP~+依赖型FDH酶活测定 | 第56-57页 |
| 3.3 结果与分析 | 第57-59页 |
| 3.3.1 BCC菌在各采集点的分布情况 | 第57页 |
| 3.3.2 BCC菌群的表型鉴定 | 第57-58页 |
| 3.3.3 筛选方案的建立 | 第58-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 结论与展望 | 第60-62页 |
| 4.1 全文总结 | 第60-61页 |
| 4.2 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 硕士期间发表成果 | 第71页 |
