中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
1 前言 | 第10-18页 |
1.1 粘虫的研究概述 | 第10-11页 |
1.1.1 粘虫简介 | 第10页 |
1.1.2 我国粘虫研究进展 | 第10-11页 |
1.2 PKG的研究概述 | 第11-13页 |
1.2.1 PKG的简介 | 第11-12页 |
1.2.2 PKG在觅食行为方面的研究 | 第12-13页 |
1.3 幼虫的密度对昆虫的影响 | 第13-16页 |
1.3.1 密度与昆虫的形态特征 | 第13-14页 |
1.3.2 密度与昆虫的生长发育 | 第14-15页 |
1.3.3 密度与昆虫的迁飞行为 | 第15-16页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-34页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 实验动物 | 第18页 |
2.1.2 人工饲料的配方及调制 | 第18-19页 |
2.1.3 主要的仪器设备 | 第19页 |
2.1.4 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.5 常用缓冲液的配制 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-34页 |
2.2.1 粘虫脑总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
2.2.2 粘虫脑总蛋白的提取及PKG蛋白活性测定 | 第22-24页 |
2.2.3 运用WesternBloting技术检测PKG蛋白的表达量 | 第24-26页 |
2.2.4 对PKG基因进行RNA干扰 | 第26-32页 |
2.2.5 PKG、PKA激活实验 | 第32-34页 |
3 实验结果与分析 | 第34-48页 |
3.1 粘虫脑总RNA的提取结果分析 | 第34页 |
3.2 各种处理蛋白提取情况和PKG蛋白活性测定 | 第34-37页 |
3.3 WesternBloting检测PKG蛋白的表达量结果分析 | 第37页 |
3.4 RNA干扰结果 | 第37-44页 |
3.4.1 粘虫PKG基因RNAi引物验证 | 第37-38页 |
3.4.2 纯化产物的凝胶检测 | 第38页 |
3.4.3 菌液的PCR检测 | 第38-39页 |
3.4.4 质粒PCR | 第39页 |
3.4.5 dsRNA浓度的检测结果 | 第39页 |
3.4.6 dsRNA注射后RNA的提取结果 | 第39-40页 |
3.4.7 qPCR检测RNA干扰结果 | 第40-44页 |
3.5 PKG、PKA激活实验 | 第44-48页 |
3.5.1 PKG激动剂的确定 | 第44-46页 |
3.5.2 激动剂处理后粘虫幼虫脑中PKG和PKA蛋白活性的变化 | 第46页 |
3.5.3 激动剂处理后粘虫蛹重和取食量的统计 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
4.1 总RNA的提取 | 第48页 |
4.2 PKG基因的选择 | 第48-49页 |
4.3 粘虫取材的选择 | 第49页 |
4.4 粘虫不同生活型的选择 | 第49-50页 |
4.5 PKG对两种生活型粘虫幼虫的影响 | 第50-51页 |
4.6 今后进一步的研究方向 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
在学期间的研究成果 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |