| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第16-34页 |
| 1.1 油菜的概述 | 第16-18页 |
| 1.1.1 油菜的价值 | 第16-17页 |
| 1.1.2 我国油菜的发展现状 | 第17-18页 |
| 1.2 植物种子发育过程中的油脂合成机理 | 第18-20页 |
| 1.2.1 脂肪酸的合成 | 第18-19页 |
| 1.2.2 三酰甘油的合成 | 第19页 |
| 1.2.3 三酰甘油的降解 | 第19-20页 |
| 1.3 通过基因工程的手段提高油料作物种子含油量 | 第20-27页 |
| 1.3.1 利用基因工程增加脂肪酸的合成 | 第21-23页 |
| 1.3.2 利用基因工程增加三酰甘油的合成 | 第23-24页 |
| 1.3.3 利用基因工程抑制三酰甘油的降解 | 第24页 |
| 1.3.4 转录因子与油料作物种子含油量 | 第24-26页 |
| 1.3.5 油脂合成的多基因策略 | 第26-27页 |
| 1.4 甘蓝型油菜种子储藏蛋白研究进展 | 第27-29页 |
| 1.4.1 Napin和Cruciferin | 第27-28页 |
| 1.4.2 oleosin | 第28-29页 |
| 1.5 植物AP2转录因子的研究进展 | 第29-33页 |
| 1.5.1 植物AP2/EREBP转录因子家族的分类与进化 | 第29-30页 |
| 1.5.2 植物AP2转录因子参与的植物生长发育过程 | 第30-33页 |
| 1.6 本实验的研究目的和立题思路 | 第33-34页 |
| 2. 材料与方法 | 第34-46页 |
| 2.1 试验材料 | 第34-36页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第34页 |
| 2.1.3 培养基 | 第34-35页 |
| 2.1.4 酶与试剂、仪器和设备 | 第35-36页 |
| 2.1.5 溶液 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-46页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.2 大肠杆菌的常规转化 | 第37页 |
| 2.2.3 大肠杆菌的快速转化 | 第37页 |
| 2.2.4 质粒DNA的抽提 | 第37页 |
| 2.2.5 Biospin胶回收试剂盒回收DNA | 第37-38页 |
| 2.2.6 T载体的连接 | 第38页 |
| 2.2.7 农杆菌感受态的制备 | 第38页 |
| 2.2.8 农杆菌的转化 | 第38页 |
| 2.2.9 农杆菌菌种的保存 | 第38-39页 |
| 2.2.10 工程感染菌株的准备 | 第39页 |
| 2.2.11 油菜子叶柄的遗传转化 | 第39-40页 |
| 2.2.12 油菜叶片总DNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.2.13 定量PCR分析 | 第41-44页 |
| 2.2.14 种子含油量与蛋白质含量的测定 | 第44页 |
| 2.2.15 气相色谱对脂肪酸含量分析 | 第44页 |
| 2.2.16 转基因植株的形态学观察与考种分析 | 第44-45页 |
| 2.2.17 油菜叶片叶绿素含量的测定 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-68页 |
| 3.1 甘蓝型油菜的遗传转化、生根与移栽 | 第46-47页 |
| 3.2 转基因油菜的分子鉴定 | 第47-50页 |
| 3.2.1 T1代油菜转基因植株标记基因的PCR鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.2 T2代油菜转基因植株标记基因的PCR鉴定 | 第48页 |
| 3.2.3 PCR阳性转基因植株的克隆测序及序列比对 | 第48-50页 |
| 3.3 转基因植株基因表达的研究 | 第50-53页 |
| 3.3.1 AP2基因的表达分析 | 第50-51页 |
| 3.3.2 Napin和Cruciferin基因的表达分析 | 第51-53页 |
| 3.4 甘蓝型油菜转基因植株的含油量、蛋白质含量、千粒重、荚果长度、每果粒数分析 | 第53-58页 |
| 3.4.1 转基因与非转基因油菜含油量、蛋白质含量比较 | 第53-55页 |
| 3.4.2 转基因与非转基因油菜千粒重的比较 | 第55-56页 |
| 3.4.3 转基因与非转基因油菜喙长、荚果长度、每果粒数的比较 | 第56-57页 |
| 3.4.4 AP2、Napin和Cruciferin基因RNA干扰株系的农艺性状分析 | 第57-58页 |
| 3.5 BnAP2与野生型植株的表型差异 | 第58-68页 |
| 3.5.1 花瓣 | 第58-60页 |
| 3.5.2 荚果 | 第60页 |
| 3.5.3 叶片 | 第60-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 4.1 启动子的选择 | 第68页 |
| 4.2 转基因植株的分子鉴定 | 第68页 |
| 4.3 AP2基因是油脂合成的负调控因子 | 第68-70页 |
| 4.4 Napin和Cruciferin基因对脂肪酸合成的影响 | 第70-71页 |
| 4.5 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
