| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 梨果实中石细胞含量对果实品质的影响 | 第14-15页 |
| 2 石细胞的形成与木质素代谢之间的关系 | 第15页 |
| 3 木质素代谢关键酶基因的研究进展 | 第15-19页 |
| 4 果树中硼营养研究进展 | 第19-21页 |
| 4.1 硼在植物中的生理功能 | 第19-20页 |
| 4.2 果树缺硼的症状 | 第20-21页 |
| 4.3 果树硼过量的症状 | 第21页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第21-24页 |
| 第二章 硼肥处理对砀山酥梨果实中石细胞、木质素及果实品质的影响 | 第24-32页 |
| 1 材料与方法 | 第25-26页 |
| 1.1 试验材料 | 第25页 |
| 1.2 试验设计 | 第25页 |
| 1.3 测定项目 | 第25-26页 |
| 1.3.1 硼含量的测定 | 第25-26页 |
| 1.3.2 石细胞与木质素含量测定 | 第26页 |
| 1.3.3 果实品质指标的测定 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| 2.1 叶面喷施硼肥对砀山酥梨果实中硼含量的影响 | 第26-27页 |
| 2.2 叶面喷施硼肥对砀山酥梨果实中石细胞含量的影响 | 第27-28页 |
| 2.3 叶面喷施硼肥对砀山酥梨果实中木质素含量的影响 | 第28-29页 |
| 2.4 叶面喷施硼肥对砀山酥梨成熟果果实品质的影响 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 硼肥处理对砀山酥梨果实中相关酶的影响 | 第32-40页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 1.1 材料 | 第33页 |
| 1.2 方法 | 第33-34页 |
| 1.2.1 木质素合成相关酶 | 第33-34页 |
| 1.2.2 抗氧化酶活性的测定 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| 2.1 硼对砀山酥梨果实发育过程中PAL活性的影响 | 第34-35页 |
| 2.2 硼对砀山酥梨果实发育过程中POD活性的影响 | 第35-36页 |
| 2.3 硼对砀山酥梨果实发育过程中SOD活性的影响 | 第36页 |
| 2.4 硼对砀山酥梨果实发育过程中CAT活性的影响 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-40页 |
| 第四章 硼肥处理对砀山酥梨果实中木质素代谢相关基因表达的影响 | 第40-50页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| 1.1 材料 | 第41页 |
| 1.1.1 试验材料 | 第41页 |
| 1.1.2 试验试剂 | 第41页 |
| 1.2 方法 | 第41-44页 |
| 1.2.1 梨果实不同发育时期果肉中RNA的提取与DNA消化 | 第41-42页 |
| 1.2.2 cDNA第一链的合成 | 第42页 |
| 1.2.3 荧光定量PCR | 第42-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| 2.1 砀山酥梨果实发育过程中PAL相对表达量的变化 | 第44页 |
| 2.2 砀山酥梨果实发育过程中C4H相对表达量的变化 | 第44-45页 |
| 2.3 砀山酥梨果实发育过程中4CL相对表达量的变化 | 第45页 |
| 2.4 砀山酥梨果实发育过程中CAD相对表达量的变化 | 第45-46页 |
| 2.5 砀山酥梨果实发育过程中HCT相对表达量的变化 | 第46-47页 |
| 2.6 砀山酥梨果实发育过程中C3H相对表达量的变化 | 第47页 |
| 2.7 砀山酥梨果实发育过程中CCoAOMT相对表达量的变化 | 第47页 |
| 2.8 砀山酥梨果实发育过程中POD相对表达量的变化 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 砀山酥梨果实中木质素代谢相关基因HCT/POD的亚细胞定位分析 | 第50-58页 |
| 1 材料、试剂与培养基的准备 | 第51页 |
| 1.1 材料 | 第51页 |
| 1.2 试剂 | 第51页 |
| 1.3 培养基的准备 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-54页 |
| 2.1 总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
| 2.2 基因克隆 | 第52页 |
| 2.3 质粒提取 | 第52-53页 |
| 2.4 表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 2.5 农杆菌感受态细胞的转化 | 第54页 |
| 2.6 农杆菌浸染烟草叶片表皮细胞及样品观察 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-57页 |
| 3.1 GFP重组表达载体的构建 | 第55页 |
| 3.2 POD::GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第55-56页 |
| 3.3 HCT::GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-58页 |
| 第六章 砀山酥梨果实中木质素代谢基因HCT/POD的功能鉴定 | 第58-68页 |
| 1 材料、试剂与培养基的准备 | 第59-60页 |
| 1.1 材料 | 第59页 |
| 1.2 试剂 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-64页 |
| 2.1 RNA的提取和cDNA的第一链的合成 | 第60页 |
| 2.2 基因的克隆与质粒的提取 | 第60页 |
| 2.3 植物表达载体的构建 | 第60-61页 |
| 2.4 番茄的遗传转化 | 第61-62页 |
| 2.5 烟草的遗传转化 | 第62-63页 |
| 2.6 转基因植株的分子鉴定 | 第63-64页 |
| 2.6.1 叶片DNA的提取 | 第63-64页 |
| 2.6.2 阳性转基因植株的鉴定 | 第64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-67页 |
| 3.1 转基因超表达载体的构建 | 第64-65页 |
| 3.2 转基因植株的遗传转化 | 第65-66页 |
| 3.2.1 番茄的遗传转化 | 第65页 |
| 3.2.2 烟草的遗传转化 | 第65-66页 |
| 3.3 转基因植株的获得 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 全文结论 | 第68-70页 |
| 创新点 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-84页 |
| 攻读硕士期间发表(待发表)论文情况 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
