摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 丛枝菌根真菌及其与植物的共生机制简介 | 第11-14页 |
1.2 Host Induced Gene Silence(HIGS)技术 | 第14页 |
1.3 Gateway技术 | 第14-15页 |
1.4 1433蛋白家族介绍 | 第15-18页 |
1.5 RACE技术 | 第18-20页 |
1.6 真核非翻译区功能介绍 | 第20-23页 |
实验路线 | 第23-24页 |
2 实验材料和方法 | 第24-37页 |
2.1 试剂 | 第24-26页 |
2.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.3 生物材料 | 第27页 |
2.4 实验方法 | 第27-37页 |
2.4.1 丛枝菌根真菌菌剂的扩繁 | 第27-28页 |
2.4.2 酵母的电转化法 | 第28-29页 |
2.4.3 酵母的Li Ac转化法 | 第29-30页 |
2.4.4 RNA的抽提与反转录 | 第30-32页 |
2.4.5 基因 5`端序列的 5`RACE克隆 | 第32-33页 |
2.4.6 孢子DNA的抽提,Fm201基因全长获得 | 第33-35页 |
2.4.7 Rhizophagus irregularis中 1433 基因的的Host Induced Gene Silence | 第35-36页 |
2.4.8 酵母 1433 基因缺失突变株的构建以及功能互补实验载体构建 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-53页 |
3.1 丛枝菌根真菌 1433 基因全序列克隆结果 | 第37-44页 |
3.1.1 Fm2013`RACE结果 | 第37-38页 |
3.1.2 Fm201基因的 5`RACE结果 | 第38-39页 |
3.1.3 Funneliformis mosseae孢子基因组DNA的抽提及反转录结果 | 第39-40页 |
3.1.4 RiBMH2基因全长和cDNA的克隆 | 第40-41页 |
3.1.5 1433 蛋白在真核生物中是高度保守的 | 第41-43页 |
3.1.6 丛枝菌根真菌 1433 蛋白酵母功能互补验证 | 第43-44页 |
3.2 启动子异源分析 | 第44-47页 |
3.2.1 启动子活性分析 | 第44-45页 |
3.2.2 启动子异源活性的荧光定量结果分析 | 第45-47页 |
3.3 1433基因在孢子萌发以及菌根共生关系建立过程中的表达谱分析 | 第47-49页 |
3.4 在环境胁迫下中菌根中 1433 的转录谱分析 | 第49-51页 |
3.5 R.irregularis DAOM197198中 1433 蛋白编码基因的HIGS | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-58页 |
4.1 丛枝菌根真菌 1433 蛋白是一个高度保守的真核生物调控蛋白 | 第53-54页 |
4.2 两种丛枝菌根真菌 1433 蛋白亚基的存在对丛枝菌根形成和丛枝发育的影响 | 第54-55页 |
4.3 丛枝菌根真菌 1433 蛋白在Msn2/STRE元件介导的信号转导通路中的作用 | 第55-58页 |
5 展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
附录 | 第66-72页 |
已发表文章 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |