摘要 | 第9-14页 |
ABSTRACT | 第14-19页 |
第一章 文献综述 | 第20-34页 |
1.1 昆虫体形体色的多样性 | 第20-21页 |
1.2 昆虫体形模式的分子基础 | 第21-25页 |
1.2.1 几丁质合成代谢基因 | 第21-23页 |
1.2.2 表皮蛋白基因 | 第23-25页 |
1.3 昆虫黑色素代谢调控网络 | 第25-29页 |
1.4 家蚕体形体色形成分子机制研究 | 第29-34页 |
1.4.1 家蚕体形突变体研究进展 | 第29-30页 |
1.4.2 家蚕体色突变体研究进展 | 第30-34页 |
第二章 引言 | 第34-38页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第34-35页 |
2.2 研究内容 | 第35-36页 |
2.3 技术路线 | 第36-38页 |
第三章 家蚕竹蚕(Bo)突变体的分子定位及候选基因筛查分析 | 第38-58页 |
3.1 材料与方法 | 第38-48页 |
3.1.1 蚕品系 | 第38页 |
3.1.2 连锁定位群体的配制 | 第38-39页 |
3.1.3 主要试剂及耗材 | 第39页 |
3.1.4 引物 | 第39-40页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第40页 |
3.1.6 使用的生物分析软件和数据库 | 第40-41页 |
3.1.7 溶液配制 | 第41页 |
3.1.8 扫描电镜样品处理及操作 | 第41-42页 |
3.1.9 基因组提取 | 第42页 |
3.1.10 PCR反应 | 第42-44页 |
3.1.11 RNA提取 | 第44-45页 |
3.1.12 cDNA模板的合成与检测 | 第45页 |
3.1.13 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第45-46页 |
3.1.14 目的片段的克隆 | 第46-47页 |
3.1.15 测序 | 第47页 |
3.1.16 数据处理 | 第47-48页 |
3.2 结果与分析 | 第48-55页 |
3.2.1 Bo突变体的表型分析 | 第48-50页 |
3.2.2 Bo突变位点的定位分析 | 第50-52页 |
3.2.3 Bo突变候选基因的筛查分析 | 第52-55页 |
3.3 讨论 | 第55-58页 |
第四章 竹蚕(Bo)候选基因BmorCPH24的功能机制和分子进化研究 | 第58-88页 |
4.1 材料与方法 | 第58-68页 |
4.1.1 实验用家蚕材料 | 第58页 |
4.1.2 引物 | 第58-59页 |
4.1.3 主要试剂及耗材 | 第59页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第59页 |
4.1.5 使用的生物分析软件和数据库 | 第59-60页 |
4.1.6 溶液配制 | 第60-61页 |
4.1.7 体外转录 | 第61-62页 |
4.1.8 原位杂交 | 第62-64页 |
4.1.9 RNAi实验 | 第64-65页 |
4.1.10 CRISPR/Cas9介导的基因组编辑 | 第65-66页 |
4.1.11 基于piggyBac转基因载体的构建 | 第66-67页 |
4.1.12 piggyBac转基因过表达载体注射 | 第67页 |
4.1.13 表皮切片染色和荧光显微镜观察 | 第67页 |
4.1.14 表皮细胞Caspase活性检测 | 第67页 |
4.1.15 系统发育分析 | 第67-68页 |
4.2 结果与分析 | 第68-83页 |
4.2.1 BmorCPH24在野生型中的时空表达模式分析 | 第68-69页 |
4.2.2 BmorCPH24基因表达与Bo突变体的表型关联 | 第69-71页 |
4.2.3 BmorCPH24基因的功能验证 | 第71-74页 |
4.2.4 BmorCPH24参与幼虫内表皮的形成 | 第74-77页 |
4.2.5 BmorCPH24与色素沉着的关系 | 第77-79页 |
4.2.6 BmorCPH24的缺陷诱导表皮细胞凋亡 | 第79-81页 |
4.2.7 BmorCPH24的进化分析 | 第81-83页 |
4.3 讨论 | 第83-88页 |
第五章 表皮蛋白缺陷的竹蚕(Bo)对环境压力耐受性分析 | 第88-98页 |
5.1 材料与方法 | 第88-90页 |
5.1.1 家蚕材料 | 第88-89页 |
5.1.2 主要试剂 | 第89页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第89页 |
5.1.4 UV照射实验 | 第89页 |
5.1.5 家蚕幼虫血液和表皮MDA含量的测定 | 第89-90页 |
5.1.6 溴氰菊酯杀虫剂敏感性生物测定 | 第90页 |
5.1.7 表皮厚度测定 | 第90页 |
5.2 结果与分析 | 第90-95页 |
5.2.1 Bo比野生型对UV具有更高的敏感性 | 第90-93页 |
5.2.2 Bo比野生型对杀虫剂具有更高的敏感性 | 第93-94页 |
5.2.3 Bo比野生型具有更薄的表皮 | 第94-95页 |
5.3 讨论 | 第95-98页 |
第六章 综合与结论 | 第98-100页 |
论文创新点 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-114页 |
附录 | 第114-116页 |
在读期间发表论文及参研课题 | 第116-118页 |
致谢 | 第118-120页 |