中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
中英文对照缩略词表 | 第7-9页 |
前言 | 第9-14页 |
1 实验材料 | 第14-19页 |
1.1 细胞和组织来源 | 第14页 |
1.2 质粒与菌种 | 第14页 |
1.3 引物 | 第14页 |
1.4 主要试剂 | 第14-16页 |
1.5 主要溶液配制 | 第16页 |
1.6 主要仪器与设备 | 第16-18页 |
1.7 技术路线图 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-30页 |
2.1 免疫组化操作步骤 | 第19页 |
2.2 免疫组织化学结果判定标准 | 第19-20页 |
2.3 细胞复苏 | 第20页 |
2.4 细胞传代 | 第20页 |
2.5 细胞冻存 | 第20-21页 |
2.6 质粒 DNA 的转化 | 第21页 |
2.7 质粒扩增 | 第21页 |
2.8 质粒的提取 | 第21-22页 |
2.9 细胞转染 | 第22-23页 |
2.10 G418 筛选稳定表达细胞系 | 第23页 |
2.11 RNA 的提取 | 第23页 |
2.12 分光光度计检测 RNA 的浓度、纯度 | 第23-24页 |
2.13 总 RNA 的逆转录 | 第24页 |
2.14 PCR 反应 | 第24-25页 |
2.15 PCR 扩增产物分析 | 第25页 |
2.16 蛋白的提取 | 第25页 |
2.17 蛋白浓度的测定(BCA 法) | 第25-26页 |
2.18 Western blot 实验 | 第26-28页 |
2.19 细胞平板克隆形成实验 | 第28页 |
2.20 细胞生长曲线 | 第28-29页 |
2.21 软琼脂实验 | 第29页 |
2.22 细胞迁移能力检测(划痕实验) | 第29-30页 |
3 结果 | 第30-41页 |
3.1 OPCML在人胃癌组织和癌旁组织表达的情况 | 第30页 |
3.2 胃癌组织中OPCML蛋白表达情况与胃癌组织临床病理特征的关系 | 第30-31页 |
3.3 OPCML的表达与胃癌患者生存率的关系 | 第31-32页 |
3.4 OPCML在正常胃粘膜和胃癌细胞中的m RNA表达水平 | 第32-33页 |
3.5 OPCML转染水平的鉴定 | 第33-34页 |
3.6 AGS细胞的G418最佳筛选浓度 | 第34-36页 |
3.7 OPCML基因对AGS克隆形成能力的影响 | 第36-37页 |
3.8 OPCML基因对AGS细胞增值能力的抑制 | 第37页 |
3.9 软琼脂实验结果分析 | 第37-39页 |
3.10 OPCML对AGS细胞迁移能力的影响 | 第39-41页 |
讨论 | 第41-45页 |
结论 | 第45-46页 |
展望 | 第46-47页 |
研究的创新点 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
硕士期间发表的论文 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |