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光呼吸产生的H2O2调控拟南芥侧根发育的机理研究

致谢第7-8页
摘要第8-9页
abstract第9-10页
第一章 文献综述第18-36页
    1.1 拟南芥侧根发育的研究进展第18-22页
        1.1.1 植物根部的作用及形态结构第18-20页
        1.1.2 拟南芥侧根的发育过程第20-22页
    1.2 影响拟南芥侧根发育的因素第22-28页
        1.2.1 环境因素对侧根的调控第22-23页
        1.2.2 植物激素对侧根的调控第23-27页
        1.2.3 信号分子对侧根的调控第27-28页
    1.3 活性氧与侧根发育第28-33页
        1.3.1 活性氧的种类及作用第28-29页
        1.3.2 H_2O_2的产生和清除途径第29-32页
        1.3.3 活性氧对侧根发育的调节第32-33页
    1.4 Gateway克隆技术第33-35页
    1.5 本研究的目的与意义第35-36页
第二章 材料与方法第36-50页
    2.1 实验材料第36-37页
        2.1.1 植物材料第36页
        2.1.2 质粒与菌株第36页
        2.1.3 常用分子生物学试剂第36-37页
        2.1.4 常用生化试剂第37页
    2.2 实验所用设备与仪器第37-38页
    2.3 常用试剂与培养基的配制第38-41页
        2.3.1 过氧化氢酶活测定缓冲液配方第38页
        2.3.2 活性氧染色缓冲液配方第38页
        2.3.3 植物组织透明化试剂配方第38-39页
        2.3.4 DNA提取液SDS配方第39页
        2.3.5 TAE缓冲液配方第39-40页
        2.3.6 农杆菌侵染缓冲液配方第40页
        2.3.7 1/2MS培养基和LB培养基配方第40-41页
    2.4 实验方法第41-50页
        2.4.1 种植与杂交第41-42页
        2.4.2 花序侵染法遗传转化拟南芥第42-43页
        2.4.3 拟南芥DNA的提取第43页
        2.4.4 Trizol法提取拟南芥总RNA第43页
        2.4.5 拟南芥mRNA逆转录为cDNA第43-44页
        2.4.6 荧光定量PCR分析第44页
        2.4.7 特异性引物PCR分析第44-45页
        2.4.8 DNA琼脂糖凝胶电泳第45页
        2.4.9 拟南芥主根根长及侧根数目的统计第45页
        2.4.10 拟南芥侧根原基观察与统计第45页
        2.4.11 Luc荧光素组织定位第45页
        2.4.12 Venus转基因材料筛选第45-46页
        2.4.13 活性氧染色(DCFH-DA法)及激光共聚焦扫描第46页
        2.4.14 过氧化氢酶酶活的测定第46页
        2.4.15 Gateway克隆构建转基因载体第46-48页
        2.4.16 实验所用引物第48-50页
第三章 H_2O_2调控拟南芥侧根发育的功能分析第50-63页
    3.1 CAT2突变导致拟南芥侧根数目显著减少第50-51页
    3.2 外源H_2O_2会抑制侧根的形成第51-54页
    3.3 cat2侧根发育受到光呼吸产生的H_2O_2调控第54-55页
    3.4 cat2叶片和根中ROS大量积累第55-57页
    3.5 cat2抑制侧根原基的出现及生长点数量第57-59页
    3.6 cat2抑制了叶片和根中的生长素信号第59-63页
第四章 CAT2过表达载体的构建及转基因植株的筛选第63-69页
    4.1 PCR扩增基因第63页
    4.2 BP反应构建入门载体第63页
    4.3 LR反应构建目的载体第63页
    4.4 转基因植株的获得第63-65页
    4.5 纯合转基因植株的筛选第65-66页
    4.6 转基因植株表型分析第66页
    4.7 转基因株系的酶活和侧根数量分析第66-69页
第五章 讨论与展望第69-71页
    5.1 H_2O_2参与调控拟南芥侧根的发育第69页
    5.2 H_2O_2积累抑制侧根原基和生长点出现第69页
    5.3 H_2O_2积累会抑制生长素信号第69-70页
    5.4 CAT2过表达有利于侧根的出现第70页
    5.5 展望第70-71页
参考文献第71-82页
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况第82-83页

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