摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
前言 | 第15-19页 |
第一章 DEHP对3β-羟类固醇脱氢酶表达水平的影响 | 第19-33页 |
1.1 实验材料 | 第19-22页 |
1.2 实验方法 | 第22-27页 |
1.3 结果 | 第27-30页 |
1.3.1 DEHP对MCF-7细胞生长状态的影响 | 第27页 |
1.3.2 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立 | 第27-28页 |
1.3.3 DEHP对3β-HSDmRNA表达水平的影响 | 第28-29页 |
1.3.4 DEHP对3β-HSD蛋白表达水平的影响 | 第29-30页 |
1.4 讨论 | 第30-33页 |
第二章 3β-HSD沉默细胞株的建立与鉴定 | 第33-49页 |
2.1 实验材料 | 第33-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-42页 |
2.3 结果 | 第42-46页 |
2.3.1 PLVX-HSD-shRNA重组载体的双酶切鉴定 | 第42页 |
2.3.2 PLVX-HSD-shRNA重组载体的测序鉴定 | 第42-44页 |
2.3.3 RNAi慢病毒载体的干扰效率 | 第44页 |
2.3.4 病毒滴度检测 | 第44-45页 |
2.3.5 Q-PCR检测3β-HSDmRNA表达水平 | 第45页 |
2.3.6 Westernblot检测3β-HSD蛋白表达水平 | 第45-46页 |
2.4 讨论 | 第46-49页 |
第三章 3β-HSD高表达细胞株的建立与鉴定 | 第49-61页 |
3.1 实验材料 | 第49-52页 |
3.2 实验方法 | 第52-55页 |
3.3 结果 | 第55-58页 |
3.3.1 PCR扩增产物鉴定 | 第55页 |
3.3.2 pLVX-HSD重组载体的鉴定 | 第55-56页 |
3.3.3 病毒滴度检测 | 第56-57页 |
3.3.4 Q-PCR检测3β-HSDmRNA表达水平 | 第57页 |
3.3.5 Westernblot检测3β-HSD蛋白表达水平 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-61页 |
第四章 3β-HSD基因沉默或高表达对DEHP毒性的影响 | 第61-83页 |
4.1 实验材料 | 第61-63页 |
4.2 实验方法 | 第63-67页 |
4.3 结果 | 第67-78页 |
4.3.1 DEHP处理后各细胞的形态学变化 | 第67页 |
4.3.2 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立 | 第67-70页 |
4.3.3 DEHP处理对氧化损伤指标的影响 | 第70-71页 |
4.3.4 DEHP处理对目的基因表达水平的影响 | 第71-74页 |
4.3.5 DEHP处理对目的蛋白表达水平的影响 | 第74-78页 |
4.4 讨论 | 第78-83页 |
第五章 DEHP的信号通路和蛋白质组学研究 | 第83-106页 |
5.1 实验材料 | 第83-85页 |
5.2 实验方法 | 第85-90页 |
5.3 结果 | 第90-102页 |
5.3.1 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立 | 第90-92页 |
5.3.2 DEHP对细胞信号通路相关基因表达的影响 | 第92页 |
5.3.3 DEHP对细胞信号通路相关蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
5.3.4 3β-HSD沉默或高表达对信号通路相关基因表达的影响 | 第93-95页 |
5.3.5 抑制剂对DEHP致信号通路相关蛋白表达改变的影响 | 第95-97页 |
5.3.6 抑制相关信号通路对目的基因表达改变的影响 | 第97-101页 |
5.3.7 蛋白质组学技术筛选差异蛋白 | 第101-102页 |
5.4 讨论 | 第102-106页 |
结论 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-116页 |
综述:邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯的毒性研究进展 | 第116-130页 |
参考文献 | 第124-130页 |
主要英文缩略语索引 | 第130-132页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第132-134页 |
致谢 | 第134页 |