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3β-HSD基因在DEHP致MCF-7细胞毒性中的作用研究

摘要第4-8页
Abstract第8-11页
前言第15-19页
第一章 DEHP对3β-羟类固醇脱氢酶表达水平的影响第19-33页
    1.1 实验材料第19-22页
    1.2 实验方法第22-27页
    1.3 结果第27-30页
        1.3.1 DEHP对MCF-7细胞生长状态的影响第27页
        1.3.2 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立第27-28页
        1.3.3 DEHP对3β-HSDmRNA表达水平的影响第28-29页
        1.3.4 DEHP对3β-HSD蛋白表达水平的影响第29-30页
    1.4 讨论第30-33页
第二章 3β-HSD沉默细胞株的建立与鉴定第33-49页
    2.1 实验材料第33-36页
    2.2 实验方法第36-42页
    2.3 结果第42-46页
        2.3.1 PLVX-HSD-shRNA重组载体的双酶切鉴定第42页
        2.3.2 PLVX-HSD-shRNA重组载体的测序鉴定第42-44页
        2.3.3 RNAi慢病毒载体的干扰效率第44页
        2.3.4 病毒滴度检测第44-45页
        2.3.5 Q-PCR检测3β-HSDmRNA表达水平第45页
        2.3.6 Westernblot检测3β-HSD蛋白表达水平第45-46页
    2.4 讨论第46-49页
第三章 3β-HSD高表达细胞株的建立与鉴定第49-61页
    3.1 实验材料第49-52页
    3.2 实验方法第52-55页
    3.3 结果第55-58页
        3.3.1 PCR扩增产物鉴定第55页
        3.3.2 pLVX-HSD重组载体的鉴定第55-56页
        3.3.3 病毒滴度检测第56-57页
        3.3.4 Q-PCR检测3β-HSDmRNA表达水平第57页
        3.3.5 Westernblot检测3β-HSD蛋白表达水平第57-58页
    3.4 讨论第58-61页
第四章 3β-HSD基因沉默或高表达对DEHP毒性的影响第61-83页
    4.1 实验材料第61-63页
    4.2 实验方法第63-67页
    4.3 结果第67-78页
        4.3.1 DEHP处理后各细胞的形态学变化第67页
        4.3.2 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立第67-70页
        4.3.3 DEHP处理对氧化损伤指标的影响第70-71页
        4.3.4 DEHP处理对目的基因表达水平的影响第71-74页
        4.3.5 DEHP处理对目的蛋白表达水平的影响第74-78页
    4.4 讨论第78-83页
第五章 DEHP的信号通路和蛋白质组学研究第83-106页
    5.1 实验材料第83-85页
    5.2 实验方法第85-90页
    5.3 结果第90-102页
        5.3.1 Q-PCR条件探索及标准曲线的建立第90-92页
        5.3.2 DEHP对细胞信号通路相关基因表达的影响第92页
        5.3.3 DEHP对细胞信号通路相关蛋白表达的影响第92-93页
        5.3.4 3β-HSD沉默或高表达对信号通路相关基因表达的影响第93-95页
        5.3.5 抑制剂对DEHP致信号通路相关蛋白表达改变的影响第95-97页
        5.3.6 抑制相关信号通路对目的基因表达改变的影响第97-101页
        5.3.7 蛋白质组学技术筛选差异蛋白第101-102页
    5.4 讨论第102-106页
结论第106-108页
参考文献第108-116页
综述:邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯的毒性研究进展第116-130页
    参考文献第124-130页
主要英文缩略语索引第130-132页
作者攻读学位期间的科研成果第132-134页
致谢第134页

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