摘要 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-16页 |
1 小肠上皮细胞 | 第8-10页 |
1.1 小肠基本结构 | 第8页 |
1.2 IEC体外分离培养研究进展 | 第8-9页 |
1.3 葡萄糖在体外培养细胞中的研究 | 第9-10页 |
2 转录因子USF的研究进展 | 第10-12页 |
2.1 USF家族的发现 | 第10页 |
2.2 USF家族基因和蛋白结构 | 第10-11页 |
2.3 USF家族的组织分布 | 第11-12页 |
2.4 USF1表达水平与疾病发生 | 第12页 |
3 肠道葡萄糖转运调节机制 | 第12-15页 |
3.1 单糖跨膜转运的基本生物学过程 | 第12-13页 |
3.2 糖转运蛋白GLUT5和SGLT1 | 第13-15页 |
4 本研究的内容、目的及意义 | 第15-16页 |
第二章 鸡小肠上皮细胞体外培养及其鉴定 | 第16-34页 |
1 试验仪器与试剂 | 第16-19页 |
1.1 试验动物 | 第16页 |
1.2 试验仪器设备 | 第16-17页 |
1.3 主要试剂 | 第17页 |
1.4 常用试剂的配制 | 第17-19页 |
2 试验方法 | 第19-23页 |
2.1 鸡IEC原代培养 | 第19-22页 |
2.2 鸡IEC鉴定 | 第22-23页 |
2.3 试验数据处理 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-31页 |
3.1 鸡IEC体外培养条件的优化 | 第23-30页 |
3.2 鸡小肠上皮细胞的鉴定 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
4.1 IEC原代培养条件优化 | 第31-33页 |
4.2 IEC鉴定 | 第33页 |
5 结论 | 第33-34页 |
第三章 USFl过表达对GLUT5、SGLT1表达量的影响 | 第34-54页 |
1 试验仪器与试剂 | 第34-35页 |
1.1 试验仪器设备 | 第34页 |
1.2 主要试剂 | 第34-35页 |
1.3 常用试剂的配制 | 第35页 |
2 试验方法 | 第35-44页 |
2.1 结合位点预测 | 第35页 |
2.2 pcDNA3.1-USF1转染鸡IEC | 第35-36页 |
2.3 鸡IEC细胞的收集 | 第36页 |
2.4 细胞RNA的提取与转录 | 第36-38页 |
2.5 目的基因cDNA表达量检测 | 第38-44页 |
2.6 试验数据处理 | 第44页 |
3 结果与分析 | 第44-50页 |
3.1 USF1在GLUT5、SGLT1基因5’调控区结合位点情况 | 第44-45页 |
3.2 鸡IEC转染后形态学观察 | 第45页 |
3.3 USF1荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第45-48页 |
3.4 基因USF1表达量测定结果 | 第48-49页 |
3.5 GLUT5和SGLT1基因的标准曲线和熔解曲线 | 第49-50页 |
3.6 GLUT5和SGLT1基因mRNA表达量检测结果 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 细胞转染方法的选择 | 第50-51页 |
4.2 实时荧光定量PCR技术 | 第51-52页 |
4.3 USF1过表达对GLUT5和SGLT1基因表达量的影响 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
全文结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
Abstract | 第61-62页 |
附录一 测序结果 | 第63-64页 |
附录二 英文缩略词一览表 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |