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结核分枝杆菌临床分离株耐药基因突变位点的检测及诊断抗原的筛选

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
英文词缩略表第12-13页
前言第13-14页
第一章 文献综述第14-26页
    1 基于病原学的结核病与耐药结核病诊断方法第14-16页
        1.1 结核病的传统细菌学诊断第14-15页
        1.2 耐药结核病的细菌学检测第15-16页
    2 结核病耐药机制及耐药结核病的分子诊断第16-22页
        2.1 结核分枝杆菌对常用药物耐药的分子机制第17-20页
        2.2 耐药结核病的分子诊断技术第20-22页
    3 基于免疫学的结核病诊断方法第22-24页
    4 展望第24-26页
第二章 实验部分第26-105页
    实验一 喀什地区结核分枝杆菌分离株的药敏试验及耐药基因的突变位点的检测第26-50页
        1 材料与方法第27-33页
            1.1 材料第27-28页
            1.2 方法第28-33页
        2 结果第33-47页
            2.1 罗氏培养基制备及结核分枝杆菌培养第33-34页
            2.2 临床分离株菌株鉴定及药敏试验结果第34页
            2.3 结核分枝杆菌相关耐药基因的扩增第34-36页
            2.4 DNA测序技术分析相关耐药基因突变位点第36-45页
            2.5 比例法药敏试验与DNA测序在检测结核分枝杆菌耐药的相关性分析第45-47页
        3 讨论第47-50页
            3.1 喀什地区菌株耐药情况分析第47-48页
            3.2 耐药相关基因的突变位点分析第48页
            3.3 DNA测序技术与药敏试验在检测菌株耐药的一致性分析第48-50页
    实验二 结核分枝杆菌蛋白的原核表达与间接ELISA检测结核病抗体的初步建立与评价第50-88页
        1 材料方法第51-63页
            1.1 材料第51-52页
            1.2 方法第52-63页
        2 结果第63-86页
            2.1 结核分枝杆菌基因的扩增第63-64页
            2.2 目的基因与pMD-19T载体重组质粒构建第64-67页
            2.3 目的基因与原核表达载体重组构建第67-71页
            2.4 目的蛋白的表达及纯化第71-74页
            2.5 蛋白浓度测定第74-75页
            2.6 蛋白Western Blot分析第75页
            2.7 间接ELISA检测结核病抗体方法的建立第75-77页
            2.8 各蛋白在检测结核病能效的分析评价第77-86页
        3 讨论第86-88页
            3.1 结核分枝杆菌蛋白在原核表达系统的表达纯化第86页
            3.2 结核病抗体检测的诊断能效第86-88页
    实验三 γ干扰素释放试验(IGRAs)刺激原的筛选鉴定第88-105页
        1 材料方法第89-93页
            1.1 材料第89-90页
            1.2方法第90-93页
        2 结果第93-102页
            2.1 T细胞表位的预测第93-94页
            2.2 T-SPOT.TB试验结果第94-95页
            2.3 双抗体夹心人IFN-γ定量ELISA方法建立第95-98页
            2.4 单个刺激抗原的筛选与评价第98-100页
            2.5 组合刺激抗原的筛选与评价第100-102页
        3 讨论第102-105页
            3.1 IGRAs结果在不同地区存在差异的原因第102-103页
            3.2 刺激抗原的筛选结果分析第103页
            3.3 影响IGRAs结果的因素第103-105页
第三章 全文总结第105-106页
创新点第106-107页
参考文献第107-116页
附录一:间接ELISA检测结核病IgG抗体方阵滴定结果第116-122页
附录二:间接ELISA检测结核病IgM抗体方阵滴定结果第122-124页
附录三:最适封闭液的确定第124-127页
附录四:血清及二抗最适孵育时间的确定第127-131页
附录五:底物最佳作用时间的确定第131-135页
致谢第135-136页
作者简介第136-137页
导师评阅表第137页

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