中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文词缩略表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1 基于病原学的结核病与耐药结核病诊断方法 | 第14-16页 |
1.1 结核病的传统细菌学诊断 | 第14-15页 |
1.2 耐药结核病的细菌学检测 | 第15-16页 |
2 结核病耐药机制及耐药结核病的分子诊断 | 第16-22页 |
2.1 结核分枝杆菌对常用药物耐药的分子机制 | 第17-20页 |
2.2 耐药结核病的分子诊断技术 | 第20-22页 |
3 基于免疫学的结核病诊断方法 | 第22-24页 |
4 展望 | 第24-26页 |
第二章 实验部分 | 第26-105页 |
实验一 喀什地区结核分枝杆菌分离株的药敏试验及耐药基因的突变位点的检测 | 第26-50页 |
1 材料与方法 | 第27-33页 |
1.1 材料 | 第27-28页 |
1.2 方法 | 第28-33页 |
2 结果 | 第33-47页 |
2.1 罗氏培养基制备及结核分枝杆菌培养 | 第33-34页 |
2.2 临床分离株菌株鉴定及药敏试验结果 | 第34页 |
2.3 结核分枝杆菌相关耐药基因的扩增 | 第34-36页 |
2.4 DNA测序技术分析相关耐药基因突变位点 | 第36-45页 |
2.5 比例法药敏试验与DNA测序在检测结核分枝杆菌耐药的相关性分析 | 第45-47页 |
3 讨论 | 第47-50页 |
3.1 喀什地区菌株耐药情况分析 | 第47-48页 |
3.2 耐药相关基因的突变位点分析 | 第48页 |
3.3 DNA测序技术与药敏试验在检测菌株耐药的一致性分析 | 第48-50页 |
实验二 结核分枝杆菌蛋白的原核表达与间接ELISA检测结核病抗体的初步建立与评价 | 第50-88页 |
1 材料方法 | 第51-63页 |
1.1 材料 | 第51-52页 |
1.2 方法 | 第52-63页 |
2 结果 | 第63-86页 |
2.1 结核分枝杆菌基因的扩增 | 第63-64页 |
2.2 目的基因与pMD-19T载体重组质粒构建 | 第64-67页 |
2.3 目的基因与原核表达载体重组构建 | 第67-71页 |
2.4 目的蛋白的表达及纯化 | 第71-74页 |
2.5 蛋白浓度测定 | 第74-75页 |
2.6 蛋白Western Blot分析 | 第75页 |
2.7 间接ELISA检测结核病抗体方法的建立 | 第75-77页 |
2.8 各蛋白在检测结核病能效的分析评价 | 第77-86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
3.1 结核分枝杆菌蛋白在原核表达系统的表达纯化 | 第86页 |
3.2 结核病抗体检测的诊断能效 | 第86-88页 |
实验三 γ干扰素释放试验(IGRAs)刺激原的筛选鉴定 | 第88-105页 |
1 材料方法 | 第89-93页 |
1.1 材料 | 第89-90页 |
1.2方法 | 第90-93页 |
2 结果 | 第93-102页 |
2.1 T细胞表位的预测 | 第93-94页 |
2.2 T-SPOT.TB试验结果 | 第94-95页 |
2.3 双抗体夹心人IFN-γ定量ELISA方法建立 | 第95-98页 |
2.4 单个刺激抗原的筛选与评价 | 第98-100页 |
2.5 组合刺激抗原的筛选与评价 | 第100-102页 |
3 讨论 | 第102-105页 |
3.1 IGRAs结果在不同地区存在差异的原因 | 第102-103页 |
3.2 刺激抗原的筛选结果分析 | 第103页 |
3.3 影响IGRAs结果的因素 | 第103-105页 |
第三章 全文总结 | 第105-106页 |
创新点 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-116页 |
附录一:间接ELISA检测结核病IgG抗体方阵滴定结果 | 第116-122页 |
附录二:间接ELISA检测结核病IgM抗体方阵滴定结果 | 第122-124页 |
附录三:最适封闭液的确定 | 第124-127页 |
附录四:血清及二抗最适孵育时间的确定 | 第127-131页 |
附录五:底物最佳作用时间的确定 | 第131-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
作者简介 | 第136-137页 |
导师评阅表 | 第137页 |