摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第9-17页 |
1.1 Toll-like受体的发现 | 第9页 |
1.2 TLRs蛋白分子结构 | 第9-10页 |
1.3 TLRs种类及其功能 | 第10-12页 |
1.4 TLR4在哺乳类中信号通路 | 第12-15页 |
1.4.1 TLR4识别LPS | 第13-14页 |
1.4.2 MyD88依赖信号通路 | 第14页 |
1.4.3 MyD88非依赖信号通路 | 第14-15页 |
1.5 TLR4在鱼类中的研究进展 | 第15页 |
1.6 TLR4在贝类中研究进展 | 第15-16页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第2章 HsTLR4、HsMyD88、HsLBP和HsAP-1的cDNA全长克隆和生物信息学分析 | 第17-33页 |
2.1 材料与方法 | 第18-22页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 方法 | 第18-22页 |
2.2 结果 | 第22-31页 |
2.2.1 总RNA提取和cDNA合成与检测 | 第22-23页 |
2.2.2 HsLBP、HsTLR4、HsMyD88和HsAP-1的RACE-PCR琼脂糖凝胶检测 | 第23-25页 |
2.2.3 HsLBP、HsTLR4、HsMyD88和HsAP-1的cDNA序列基本生物学信息 | 第25-27页 |
2.2.4 HsLBP、HsTLR4、HsMyD88和HsAP-1的NJ(Neighbor-Joining)系统进化树 | 第27-31页 |
2.3 讨论 | 第31-33页 |
第3章 LPS诱导下HsLBP、HsTLR4、HsMyD88和HsAP-1的mRNA在各组织表达分析 | 第33-43页 |
3.1 材料和方法 | 第34-36页 |
3.1.1 材料 | 第34页 |
3.1.2 方法 | 第34-36页 |
3.2 结果 | 第36-40页 |
3.3 讨论 | 第40-43页 |
第4章 HsTLR4和HsMyD88之间直接相互作用的探究 | 第43-65页 |
4.1 材料和方法 | 第44-51页 |
4.1.1 材料 | 第44页 |
4.1.2 方法 | 第44-51页 |
4.2 结果 | 第51-62页 |
4.2.1 酵母双杂交 | 第51-53页 |
4.2.2 双分子荧光互作 | 第53-58页 |
4.2.3 HsTLR4-△LRRs(597-897)和HsMyD88-ORF(1-475)蛋白诱导结果 | 第58页 |
4.2.4 HsTLR4-△LRRs(597-897)和HsMyD88-ORF(1-475)蛋白纯化 | 第58-59页 |
4.2.5 GST标签蛋白的诱导和纯化 | 第59-60页 |
4.2.6 HsMyD88的Death(1-119)结构域蛋白的诱导与纯化 | 第60页 |
4.2.7 GST-pulldown | 第60-62页 |
4.3 讨论 | 第62-65页 |
第5章 结论与展望 | 第65-67页 |
5.1 结论 | 第65页 |
5.2 展望 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
附录A 实验仪器 | 第78-79页 |
附录B 主要试剂和对应公司名称 | 第79-81页 |
附录C 实验所用引物及对应用途 | 第81-85页 |
攻读硕士期间的研究成果 | 第85页 |