| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1.1 片形吸虫病的概述 | 第14-15页 |
| 1.2 片形吸虫病的诊断研究 | 第15-17页 |
| 1.2.1 血清学检测 | 第16-17页 |
| 1.2.2 粪抗原检测 | 第17页 |
| 1.2.3 牛奶抗原/抗体检测 | 第17页 |
| 1.3 片形吸虫的疫苗研究 | 第17-19页 |
| 1.4 片形吸虫体被蛋白的研究 | 第19页 |
| 1.5 CD59样蛋白的研究 | 第19-20页 |
| 1.6 生物信息学研究 | 第20页 |
| 1.7 本课题的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 大片吸虫两种CD59样蛋白编码区扩增、测序和分析 | 第22-37页 |
| 2.1 材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 虫种及菌种 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第22页 |
| 2.1.5 FgCD59样蛋白质编码区扩增引物和M13引物 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-27页 |
| 2.2.1 大片吸虫成虫总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.2 FgCD59样蛋白序列反转录扩增和PCR扩增 | 第23-25页 |
| 2.2.3 序列测序 | 第25页 |
| 2.2.4 FgCD59样蛋白质编码区序列的克隆 | 第25页 |
| 2.2.5 阳性克隆的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.6 蛋白序列的测序分析与对比分析 | 第26-27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-35页 |
| 2.3.1 克隆测序结果 | 第27-29页 |
| 2.3.2 FgCD59-1与FgCD59-2的碱基序列分析 | 第29-30页 |
| 2.3.3 FgCD59-1与FgCD59-2的蛋白序列分析 | 第30-33页 |
| 2.3.4 FgCD59-1、FgCD59-2与FhCD59-1、FhCD59-2序列比对 | 第33-34页 |
| 2.3.5 序列系统进化树的构建和分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 大片吸虫CD59-1, CD59-2的蛋白质结构预测和分析 | 第37-44页 |
| 3.1 材料 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 FgCD59样蛋白初级结构性质预测 | 第37页 |
| 3.2.2 FgCD59样蛋白跨膜结构预测 | 第37页 |
| 3.2.3 FgCD59样蛋白的亚细胞定位 | 第37页 |
| 3.2.4 FgCD59样蛋白二级结构分析 | 第37页 |
| 3.2.5 FgCD59样蛋白三级结构预测 | 第37-38页 |
| 3.3 结果 | 第38-42页 |
| 3.3.1 FgCD59样蛋白初级结构分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 FgCD59样蛋白跨膜区域预测 | 第39-40页 |
| 3.3.3 FgCD59样蛋白二级结构预测 | 第40-41页 |
| 3.3.4 FgCD59样蛋白的亚细胞定位 | 第41页 |
| 3.3.5 FgCD59样蛋白三级结构预测 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-44页 |
| 第四章 大片吸虫两种CD59样蛋白的体外重组表达 | 第44-69页 |
| 4.1 材料 | 第44-46页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第44页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第44页 |
| 4.1.3 试剂的配制 | 第44-45页 |
| 4.1.4 FgCD59样蛋白质编码区扩增引物 | 第45-46页 |
| 4.2 方法 | 第46-52页 |
| 4.2.1 大片吸虫成虫总RNA的提取 | 第46页 |
| 4.2.2 目的蛋白序列反转录扩增和PCR扩增 | 第46-47页 |
| 4.2.3 PCR产物纯化和测序 | 第47页 |
| 4.2.4 FgCD59样蛋白质编码区序列的克隆 | 第47页 |
| 4.2.5 阳性克隆的鉴定 | 第47页 |
| 4.2.6 表达载体的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| 4.2.7 重组蛋白的表达与诱导表达条件的检测和优化 | 第48-49页 |
| 4.2.8 重组蛋白的纯化 | 第49-52页 |
| 4.2.9 Western blot检测 | 第52页 |
| 4.3 结果 | 第52-66页 |
| 4.3.1 目的序列的扩增 | 第52-53页 |
| 4.3.2 构建载体鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3.3 表达载体的构建及鉴定 | 第54-63页 |
| 4.3.4 重组蛋白的Western blot鉴定 | 第63-66页 |
| 4.4 讨论 | 第66-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
