摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-23页 |
1.1 防御素的生物活性 | 第13-14页 |
1.1.1 抗菌作用 | 第13页 |
1.1.2 抗病毒作用 | 第13页 |
1.1.3 细胞毒作用 | 第13-14页 |
1.1.4 免疫调节作用 | 第14页 |
1.2 防御素的分类 | 第14-15页 |
1.2.1 α-防御素 | 第14页 |
1.2.2 β-防御素 | 第14页 |
1.2.3 θ-防御素 | 第14-15页 |
1.3 E_2与绵羊β防御素表达关系 | 第15页 |
1.4 转录组介绍 | 第15-17页 |
1.4.1 转录组测序基本原理 | 第15页 |
1.4.2 转录组测序流程 | 第15-16页 |
1.4.3 转录组数据分析 | 第16-17页 |
1.4.4 转录组测序主要应用 | 第17页 |
1.5 PI3K-Akt信号通路的研究进展 | 第17-20页 |
1.5.1 PI3K-Akt信号通路概述 | 第17-19页 |
1.5.2 PI3K-Akt信号通路的分子生物学功能 | 第19-20页 |
1.6 MAPK信号通路的研究进展 | 第20-21页 |
1.6.1 MAPK信号通路的概述 | 第20页 |
1.6.2 MAPK信号通路主要途径 | 第20-21页 |
1.7 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
2 实验一 E_2对绵羊输卵管上皮细胞SBD-1表达的影响 | 第23-35页 |
2.1 实验材料 | 第23页 |
2.1.1 主要材料 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-29页 |
2.2.1 绵羊输卵管上皮细胞的培养 | 第23-25页 |
2.2.2 细胞增殖和 E_2对细胞毒性检测 | 第25页 |
2.2.3 影响绵羊输卵管上皮细胞SBD-1表达的最适E_2浓度、时间点确定 | 第25-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-33页 |
2.3.1 绵羊输卵管上皮细胞培养 | 第29页 |
2.3.2 细胞增殖和E_2细胞毒性检测 | 第29-30页 |
2.3.3 影响绵羊输卵管上皮细胞SBD-1表达的最适E_2浓度、时间点确定 | 第30-33页 |
2.4 讨论 | 第33-34页 |
2.5 小结 | 第34-35页 |
3 实验二E_2对绵羊输卵管上皮细胞相关基因表达的影响 | 第35-48页 |
3.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.1 主要试剂 | 第35页 |
3.1.2 主要仪器 | 第35页 |
3.2 实验方法 | 第35-40页 |
3.2.1 样本RNA分离、纯化和质检 | 第35-36页 |
3.2.2 文库制备与上机测序 | 第36页 |
3.2.3 基因差异表达转录组学分析 | 第36页 |
3.2.4 添加E_2后细胞内pik3r3、Akt、mapk3表达量变化 | 第36-37页 |
3.2.5 添加E_2后细胞内pik3r3、Akt、mapk3蛋白变化 | 第37-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-47页 |
3.3.1 RNA质检结果 | 第40页 |
3.3.2 测序数据质量 | 第40-42页 |
3.3.3 与参考基因组比对结果 | 第42页 |
3.3.4 基因表达水平及差异基因分析 | 第42页 |
3.3.5 差异基因GO富集性分析 | 第42-43页 |
3.3.6 差异基因KEGG富集性分析 | 第43-44页 |
3.3.7 E_2对细胞内pik3r3、Akt、mapk3表达的影响 | 第44-46页 |
3.3.8 E_2对细胞内pik3r3、Akt、mapk3蛋白量的影响 | 第46-47页 |
3.4 讨论 | 第47页 |
3.5 小结 | 第47-48页 |
4 实验三E_2调控SBD-1表达过程中PI3K-Akt、MAPK通路的作用 | 第48-52页 |
4.1 实验材料 | 第48-49页 |
4.1.1 主要试剂 | 第48页 |
4.1.2 主要仪器 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49页 |
4.2.1 体外添加受体抑制剂对细胞的毒性作用 | 第49页 |
4.2.2 E_2调控SBD-1表达过程中PI3K-Akt、MAPK通路的作用 | 第49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-50页 |
4.3.1 体外添加受体抑制剂对细胞的毒性作用检测结果 | 第49-50页 |
4.3.2 E_2调控SBD-1表达过程中PI3K-Akt、MAPK通路的作用 | 第50页 |
4.4 讨论 | 第50-51页 |
4.5 小结 | 第51-52页 |
5 全文结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
作者简介 | 第57页 |