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小麦抗条锈病基因Yr10及防卫相关基因TaMDHAR4的功能分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第13-45页
    1.1 植物抗性机制第13-23页
        1.1.1 植物的抗病性第13-15页
        1.1.2 植物与病原菌互作的分子机制第15-20页
        1.1.3 植物抗病基因第20-23页
    1.2 小麦条锈病的研究概况第23-32页
        1.2.1 小麦条锈病的危害第23-25页
        1.2.2 小麦条锈病的研究进展第25-27页
        1.2.3 小麦抗条锈病基因的研究概况第27-32页
    1.3 基因功能研究中相关技术的应用第32-43页
        1.3.1 生物信息学技术第32-33页
        1.3.2 基因的时空表达技术第33-34页
        1.3.3 小麦转基因技术第34-36页
        1.3.4 病毒诱导基因沉默技术第36-43页
    1.4 本研究的目的及意义第43-45页
第二章 BSMV-VIGS 体系的优化探索第45-65页
    2.1 前言第45-47页
    2.2 材料、试剂及仪器第47-48页
        2.2.1 供试材料第47页
        2.2.2 材料常规接种和培养第47页
        2.2.3 试剂第47页
        2.2.4 仪器第47-48页
    2.3 实验方法第48-56页
        2.3.1 BSMV-VIGS 载体构建第48-54页
        2.3.2 BSMV-VIGS 体系的评价第54-56页
        2.3.3 插入片段的大小对 BSMV-VIGS 的影响第56页
        2.3.4 插入片段的方向对 BSMV-VIGS 的影响第56页
        2.3.5 目的基因沉默后的表达模式第56页
        2.3.6 BSMV 介导的 PDS 在麦穗和种子中的沉默第56页
    2.4 结果与分析第56-62页
        2.4.1 小麦叶片总 RNA 的提取第56-57页
        2.4.2 插入片段的扩增第57-58页
        2.4.3 插入片段的大小对 BSMV-VIGS 的影响第58-59页
        2.4.4 插入片段的方向对 BSMV-VIGS 的影响第59页
        2.4.5 目的基因沉默后的表达模式第59-60页
        2.4.6 BSMV 介导的 PDS 在麦穗和种子中的沉默第60-62页
    2.5 讨论与结论第62-65页
第三章 小麦抗条锈基因 Yr10 的功能分析第65-87页
    3.1 前言第65-66页
    3.2 材料、试剂及仪器第66-67页
        3.2.1 供试材料第66页
        3.2.2 材料常规接种和培养第66-67页
        3.2.3 试剂第67页
        3.2.4 仪器第67页
    3.3 实验方法第67-70页
        3.3.1 候选基因的生物信息学分析第67页
        3.3.2 BSMV-VIGS 载体构建第67-68页
        3.3.3 目的基因的 BSMV-VIGS 分析第68-69页
        3.3.4 基因枪法转化试验第69-70页
    3.4 结果与分析第70-83页
        3.4.1 候选序列的生物信息学分析第70-75页
        3.4.2 候选序列的功能分析(BSMV-VIGS)第75-82页
        3.4.3 候选序列的功能分析(基因枪转化试验)第82-83页
    3.5 讨论与结论第83-87页
第四章 小麦 TaMDHAR4 基因的克隆及功能验证第87-112页
    4.1 前言第87-89页
    4.2 材料、试剂及仪器第89-90页
        4.2.1 供试材料第89页
        4.2.2 材料常规接种和培养第89页
        4.2.3 试剂第89页
        4.2.4 仪器第89-90页
    4.3 实验方法第90-97页
        4.3.1 RNA 的提取与纯化第90-91页
        4.3.2 cDNA 第一链的合成第91页
        4.3.3 引物的设计与合成第91-92页
        4.3.4 RT-PCR 扩增第92-93页
        4.3.5 T-easy vector 连接反应第93页
        4.3.6 感受态细胞的制备及转化第93-94页
        4.3.7 质粒提取(2.3.1.10)第94页
        4.3.8 质粒的酶切鉴定第94页
        4.3.9 基因片段的序列测定第94页
        4.3.10 基因全长的序列拼接及分析第94-95页
        4.3.11 TaMDHAR4 的表达特征分析第95-96页
        4.3.12 BSMV-VIGS 介导的 TaMDHAR4 沉默第96-97页
    4.4 结果与分析第97-109页
        4.4.1 小麦叶片总 RNA 的提取第97页
        4.4.2 TaMDHAR4 的全长 cDNA 克隆第97-99页
        4.4.3 TaMDHAR4 的序列分析第99-102页
        4.4.4 TaMDHAR4 的表达特征分析第102-105页
        4.4.5 BSMV-VIGS 介导的 TaMDHAR4 沉默第105-109页
    4.5 讨论与结论第109-112页
全文结论第112页
本文创新点第112-113页
参考文献第113-135页
致谢第135-137页
作者简介第137页

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