致谢 | 第7-10页 |
摘要 | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 昆虫病原真菌球孢白僵菌研究现状 | 第12-13页 |
1.2 凝溶胶蛋白研究现状 | 第13-17页 |
1.2.1 丝状真菌中肌动蛋白及其结合蛋白 | 第13-14页 |
1.2.2 凝溶胶蛋白的结构与功能 | 第14-17页 |
1.3 丝状真菌SNF1/AMPK途径的研究现状 | 第17-19页 |
1.4 研究目的和意义 | 第19-20页 |
第2章 BbGEL1基因功能研究 | 第20-43页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 菌株和培养基 | 第20-21页 |
2.1.2 试剂 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-28页 |
2.2.1 核酸提取 | 第21-22页 |
2.2.2 BbGEL1克隆、分析及其胞内定位 | 第22-23页 |
2.2.3 BbGEL1基因的敲除与回补 | 第23-25页 |
2.2.4 生物学表型分析 | 第25-26页 |
2.2.5 观察肌动蛋白结构变化 | 第26页 |
2.2.6 观察菌丝和孢子的超微结构 | 第26-27页 |
2.2.7 液体培养物的pH、酶活、有机酸含量测定 | 第27-28页 |
2.2.8 毒力测定 | 第28页 |
2.3 实验结果 | 第28-40页 |
2.3.1 BbGEL1序列分析、细胞定位及其缺失菌株构建 | 第28-31页 |
2.3.2 肌动蛋白结构的观察 | 第31-32页 |
2.3.3 碳氮源及胁迫对生长的影响 | 第32-34页 |
2.3.4 菌株产酸能力变化 | 第34-36页 |
2.3.5 胞外蛋白水解酶活变化 | 第36页 |
2.3.6 基因敲除对菌株产孢的影响 | 第36-38页 |
2.3.7 孢子形态的变化 | 第38-40页 |
2.3.8 毒力测定结果 | 第40页 |
2.4 结果讨论 | 第40-43页 |
第3章 BbSNFl基因调控分生孢子产生的下游基因 | 第43-53页 |
3.1 材料和方法 | 第43页 |
3.2 实验方法 | 第43-45页 |
3.2.1 菌株分生孢子产孢量测定 | 第43-44页 |
3.2.2 菌丝中游离氨基酸含量测定 | 第44页 |
3.2.3 BbSNF1敲除菌株分生孢子产孢量恢复试验 | 第44页 |
3.2.4 BbSNF1介导的基因表达RNA-seq分析 | 第44页 |
3.2.5 数据与序列分析 | 第44-45页 |
3.3 实验结果 | 第45-50页 |
3.3.1 BbSNF1有利于菌株生长和产孢 | 第45-46页 |
3.3.2 BbSNF1调控孢内游离氨基酸的代谢 | 第46页 |
3.3.3 外源性氨基酸的添加回复△BbSNF1产孢 | 第46-49页 |
3.3.4 基因组学表达分析 | 第49-50页 |
3.4 结果讨论 | 第50-53页 |
附表 | 第53-63页 |
结语 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
Summary | 第72-74页 |