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球孢白僵菌凝溶胶蛋白基因BbGEL1的功能鉴定与AMPK蛋白激酶基因BbSNF1调控分生孢子产生相关基因的分析

致谢第7-10页
摘要第10-12页
第1章 文献综述第12-20页
    1.1 昆虫病原真菌球孢白僵菌研究现状第12-13页
    1.2 凝溶胶蛋白研究现状第13-17页
        1.2.1 丝状真菌中肌动蛋白及其结合蛋白第13-14页
        1.2.2 凝溶胶蛋白的结构与功能第14-17页
    1.3 丝状真菌SNF1/AMPK途径的研究现状第17-19页
    1.4 研究目的和意义第19-20页
第2章 BbGEL1基因功能研究第20-43页
    2.1 材料第20-21页
        2.1.1 菌株和培养基第20-21页
        2.1.2 试剂第21页
    2.2 实验方法第21-28页
        2.2.1 核酸提取第21-22页
        2.2.2 BbGEL1克隆、分析及其胞内定位第22-23页
        2.2.3 BbGEL1基因的敲除与回补第23-25页
        2.2.4 生物学表型分析第25-26页
        2.2.5 观察肌动蛋白结构变化第26页
        2.2.6 观察菌丝和孢子的超微结构第26-27页
        2.2.7 液体培养物的pH、酶活、有机酸含量测定第27-28页
        2.2.8 毒力测定第28页
    2.3 实验结果第28-40页
        2.3.1 BbGEL1序列分析、细胞定位及其缺失菌株构建第28-31页
        2.3.2 肌动蛋白结构的观察第31-32页
        2.3.3 碳氮源及胁迫对生长的影响第32-34页
        2.3.4 菌株产酸能力变化第34-36页
        2.3.5     胞外蛋白水解酶活变化第36页
        2.3.6 基因敲除对菌株产孢的影响第36-38页
        2.3.7 孢子形态的变化第38-40页
        2.3.8 毒力测定结果第40页
    2.4 结果讨论第40-43页
第3章 BbSNFl基因调控分生孢子产生的下游基因第43-53页
    3.1 材料和方法第43页
    3.2 实验方法第43-45页
        3.2.1 菌株分生孢子产孢量测定第43-44页
        3.2.2 菌丝中游离氨基酸含量测定第44页
        3.2.3 BbSNF1敲除菌株分生孢子产孢量恢复试验第44页
        3.2.4 BbSNF1介导的基因表达RNA-seq分析第44页
        3.2.5 数据与序列分析第44-45页
    3.3 实验结果第45-50页
        3.3.1 BbSNF1有利于菌株生长和产孢第45-46页
        3.3.2 BbSNF1调控孢内游离氨基酸的代谢第46页
        3.3.3 外源性氨基酸的添加回复△BbSNF1产孢第46-49页
        3.3.4 基因组学表达分析第49-50页
    3.4 结果讨论第50-53页
附表第53-63页
结语第63-64页
参考文献第64-72页
Summary第72-74页

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