| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文縮略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-21页 |
| 1.1 禽呼肠孤病毒概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 病原学 | 第14-15页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第15页 |
| 1.1.3 诊断方法 | 第15-16页 |
| 1.2 ARV编码蛋白及其功能 | 第16-19页 |
| 1.2.1 λA蛋白 | 第16页 |
| 1.2.2 λB蛋白 | 第16-17页 |
| 1.2.3 λ.C蛋白 | 第17页 |
| 1.2.4 λA蛋白 | 第17页 |
| 1.2.5 μB蛋白 | 第17页 |
| 1.2.6 μS蛋白 | 第17-18页 |
| 1.2.7 σA蛋白 | 第18页 |
| 1.2.8 σB蛋白 | 第18页 |
| 1.2.9 σC蛋白 | 第18页 |
| 1.2.10 p10蛋白 | 第18-19页 |
| 1.2.11 p17蛋白 | 第19页 |
| 1.2.12 σNS蛋白 | 第19页 |
| 1.3 ARV σB与σC抗原表位研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 两株禽呼肠孤病毒分离株生物学特性分析 | 第21-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1.1 病毒、细胞、菌种、病料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 病毒的增殖、RNA的提取及反转录cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.1.4 ARV各基因组片段特异性引物的设计 | 第21-22页 |
| 2.1.5 ARV各基因组片段的扩增和拼接 | 第22页 |
| 2.1.6 细胞半数致死量的测定 | 第22-23页 |
| 2.1.7 复制动力学研究 | 第23页 |
| 2.1.8 鸡胚半数致死量的测定 | 第23页 |
| 2.2 实验结果 | 第23-25页 |
| 2.2.1 全基因组的扩增及测序 | 第23页 |
| 2.2.2 全基因组同源性分析 | 第23-25页 |
| 2.2.3 TCID_(50)和ELD_(50)的测定结果 | 第25页 |
| 2.2.4 体外复制动力学研究 | 第25页 |
| 2.3 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 ARV σB蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定 | 第27-39页 |
| 3.1 试验方法和材料 | 第27-33页 |
| 3.1.1 仪器、试剂、病毒、细胞、质粒和试验动物 | 第27页 |
| 3.1.2 ARV σB单克隆抗体的制备及鉴定 | 第27-28页 |
| 3.1.3 σB蛋白的末端重复分段截短表达 | 第28-31页 |
| 3.1.4 末端单氨基酸截短表达 | 第31-32页 |
| 3.1.5 σB蛋白抗原表位的鉴定 | 第32页 |
| 3.1.6 σB蛋白B细胞表位同源性分析 | 第32页 |
| 3.1.7 MAbs与DRV和TRV的交叉反应活性分析 | 第32-33页 |
| 3.2 结果 | 第33-38页 |
| 3.2.1 ARV σB蛋白的原核表达与鉴定 | 第33-34页 |
| 3.2.2 ARV σB蛋白MAbs生物学活性鉴定 | 第34页 |
| 3.2.3 ARV σB蛋白B细胞表位鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.2.4 ARV σB蛋白B细胞表位反应活性鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.5 ARV σB蛋白B细胞表位同源性及交叉反应分析 | 第36-38页 |
| 3.3 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 ARV σC蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位的鉴定 | 第39-50页 |
| 4.1 试验方法和材料 | 第39-44页 |
| 4.1.1 仪器、试剂、病毒、细胞、质粒和试验动物 | 第39页 |
| 4.1.2 ARV σC单克隆抗体的制备及鉴定 | 第39-40页 |
| 4.1.3 σC蛋白的末端重复分段截短表达 | 第40-42页 |
| 4.1.4 末端单氨基酸截短表达 | 第42-43页 |
| 4.1.5 σC蛋白抗原表位的鉴定 | 第43页 |
| 4.1.6 σC蛋白B细胞表位同源性分析 | 第43-44页 |
| 4.1.7 MAbs与其他ARV和DRV的交叉反应活性分析 | 第44页 |
| 4.2 结果 | 第44-48页 |
| 4.2.1 ARV σC蛋白的原核表达与鉴定 | 第44-45页 |
| 4.2.2 ARV σC蛋白MAbs生物学活性鉴定 | 第45-46页 |
| 4.2.3 ARV σC蛋白B细胞表位鉴定结果 | 第46-47页 |
| 4.2.4 ARV σC蛋白B细胞表位同源性及交叉反应分析 | 第47-48页 |
| 4.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 ARV σB-σC蛋白包被间接ELISA方法的建立 | 第50-60页 |
| 5.1 材料与方法 | 第50-52页 |
| 5.1.1 载体和血清 | 第50页 |
| 5.1.2 仪器及试剂 | 第50页 |
| 5.1.3 σB与σC蛋白的表达和纯化 | 第50页 |
| 5.1.4 σB-σC蛋白包被ELISA条件的优化 | 第50-51页 |
| 5.1.5 判定标准设定 | 第51页 |
| 5.1.6 符合性实验 | 第51-52页 |
| 5.1.7 特异性实验 | 第52页 |
| 5.1.8 敏感性试验 | 第52页 |
| 5.1.9 ARV人工接种动物后血清抗体动态消长规律研究 | 第52页 |
| 5.2 实验结果 | 第52-58页 |
| 5.2.1 蛋白原核表达及蛋白纯化 | 第52-53页 |
| 5.2.2 σB-σC ELISA最佳反应程序的确定 | 第53-56页 |
| 5.2.3 判定标准的确定 | 第56-57页 |
| 5.2.5 特异性检测结果 | 第57页 |
| 5.2.6 敏感性检测结果 | 第57页 |
| 5.2.7 ARV人工接种动物的抗体消长规律研究 | 第57-58页 |
| 5.3 讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 全文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70页 |
