摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-19页 |
1.1 胡杨的简介 | 第10-11页 |
1.2 拟南芥的简介与培养 | 第11-13页 |
1.2.1 拟南芥的概况 | 第11页 |
1.2.2 拟南芥突变对于植物基因功能的研究意义 | 第11-12页 |
1.2.3 拟南芥的栽培方法 | 第12-13页 |
1.3 植物遗传转化法概况 | 第13-14页 |
1.3.1 以农杆菌为介质的转化 | 第13页 |
1.3.2 以基因枪为介质的遗传转化 | 第13页 |
1.3.3 以原生质体为介质的遗传转化 | 第13-14页 |
1.4 拟南芥的转基因方法 | 第14-15页 |
1.4.1 种子浸染法 | 第14页 |
1.4.2 喷雾法 | 第14页 |
1.4.3 剪涂法 | 第14页 |
1.4.4 真空渗入法 | 第14-15页 |
1.4.5 Floral-dip方法 | 第15页 |
1.5 鉴定转基因植物的后代 | 第15-17页 |
1.5.1 利用基因检测 | 第15-17页 |
1.5.2 分子检测 | 第17页 |
1.6 本研究的主要目的与意义 | 第17-19页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第19页 |
2 材料与方法 | 第19-26页 |
2.1 供试材料 | 第19页 |
2.2 主要仪器与设备 | 第19页 |
2.3 药品与试剂 | 第19-20页 |
2.4 培养基质与渗透液 | 第20页 |
2.5 研究方法 | 第20-23页 |
2.5.1 拟南芥种植培养方法 | 第20页 |
2.5.2 农杆菌的活化培养 | 第20-21页 |
2.5.3 拟南芥Floral-dip转化方法 | 第21页 |
2.5.4 拟南芥阳性转化子T_1代种子的筛选方法 | 第21-22页 |
2.5.5 拟南芥T_1代种子消毒 | 第22-23页 |
2.5.6 阳性植株的移栽 | 第23页 |
2.5.7 阳性植株的栽培管理 | 第23页 |
2.6 拟南芥阳性植株的DNA提取 | 第23-26页 |
2.6.1 PCR引物序列、扩增体系及程序方法 | 第23-24页 |
2.6.2 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第24-25页 |
2.6.3 阳性转化子的表型观察 | 第25页 |
2.6.4 阳性转化子纯合子的筛选方法 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-38页 |
3.1 温度、光照、水分等对拟南芥栽培的作用 | 第26-27页 |
3.1.1 温度的作用 | 第26页 |
3.1.2 光照的作用 | 第26-27页 |
3.1.3 水分的作用 | 第27页 |
3.2 培养基质对发芽、成活、始花时间的作用 | 第27页 |
3.3 农杆菌在液体培养基中活化时间筛选 | 第27-28页 |
3.4 转化过程影响因素分析及渗透液转化效率比较分析 | 第28-29页 |
3.5 拟南芥种子消毒方法的比较分析 | 第29页 |
3.6 抗性培养基筛选阳性转化植株的观察记录 | 第29-30页 |
3.7 拟南芥阳性转化子DNA提取分析 | 第30-32页 |
3.8 拟南芥转基因植株NPTⅡ基因检测 | 第32-33页 |
3.9 拟南芥突变体表型变化观测结果 | 第33-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
4.1 拟南芥培养及后期管理 | 第38-39页 |
4.2 实验中SilwetL-77的应用及转化体系优化 | 第39页 |
4.3 侵染过程中影响转化效率的关键因素 | 第39-40页 |
4.4 拟南芥种子两种消毒方法优缺点比较 | 第40页 |
4.5 提高DNA提取的效率与纯度对阳性拟南芥鉴定的影响 | 第40页 |
4.6 PCR鉴定筛选引物与程序 | 第40-41页 |
4.7 T_1代拟南芥表型差异讨论 | 第41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附图 | 第47-51页 |
作者简介 | 第51页 |