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胡杨大片段基因转化拟南芥的体系优化和突变体筛选

摘要第3-4页
Abstract第4页
缩略语表第9-10页
1 引言第10-19页
    1.1 胡杨的简介第10-11页
    1.2 拟南芥的简介与培养第11-13页
        1.2.1 拟南芥的概况第11页
        1.2.2 拟南芥突变对于植物基因功能的研究意义第11-12页
        1.2.3 拟南芥的栽培方法第12-13页
    1.3 植物遗传转化法概况第13-14页
        1.3.1 以农杆菌为介质的转化第13页
        1.3.2 以基因枪为介质的遗传转化第13页
        1.3.3 以原生质体为介质的遗传转化第13-14页
    1.4 拟南芥的转基因方法第14-15页
        1.4.1 种子浸染法第14页
        1.4.2 喷雾法第14页
        1.4.3 剪涂法第14页
        1.4.4 真空渗入法第14-15页
        1.4.5 Floral-dip方法第15页
    1.5 鉴定转基因植物的后代第15-17页
        1.5.1 利用基因检测第15-17页
        1.5.2 分子检测第17页
    1.6 本研究的主要目的与意义第17-19页
    1.7 本研究的技术路线第19页
2 材料与方法第19-26页
    2.1 供试材料第19页
    2.2 主要仪器与设备第19页
    2.3 药品与试剂第19-20页
    2.4 培养基质与渗透液第20页
    2.5 研究方法第20-23页
        2.5.1 拟南芥种植培养方法第20页
        2.5.2 农杆菌的活化培养第20-21页
        2.5.3 拟南芥Floral-dip转化方法第21页
        2.5.4 拟南芥阳性转化子T_1代种子的筛选方法第21-22页
        2.5.5 拟南芥T_1代种子消毒第22-23页
        2.5.6 阳性植株的移栽第23页
        2.5.7 阳性植株的栽培管理第23页
    2.6 拟南芥阳性植株的DNA提取第23-26页
        2.6.1 PCR引物序列、扩增体系及程序方法第23-24页
        2.6.2 琼脂糖凝胶电泳检测第24-25页
        2.6.3 阳性转化子的表型观察第25页
        2.6.4 阳性转化子纯合子的筛选方法第25-26页
3 结果与分析第26-38页
    3.1 温度、光照、水分等对拟南芥栽培的作用第26-27页
        3.1.1 温度的作用第26页
        3.1.2 光照的作用第26-27页
        3.1.3 水分的作用第27页
    3.2 培养基质对发芽、成活、始花时间的作用第27页
    3.3 农杆菌在液体培养基中活化时间筛选第27-28页
    3.4 转化过程影响因素分析及渗透液转化效率比较分析第28-29页
    3.5 拟南芥种子消毒方法的比较分析第29页
    3.6 抗性培养基筛选阳性转化植株的观察记录第29-30页
    3.7 拟南芥阳性转化子DNA提取分析第30-32页
    3.8 拟南芥转基因植株NPTⅡ基因检测第32-33页
    3.9 拟南芥突变体表型变化观测结果第33-38页
4 讨论第38-41页
    4.1 拟南芥培养及后期管理第38-39页
    4.2 实验中SilwetL-77的应用及转化体系优化第39页
    4.3 侵染过程中影响转化效率的关键因素第39-40页
    4.4 拟南芥种子两种消毒方法优缺点比较第40页
    4.5 提高DNA提取的效率与纯度对阳性拟南芥鉴定的影响第40页
    4.6 PCR鉴定筛选引物与程序第40-41页
    4.7 T_1代拟南芥表型差异讨论第41页
5 结论第41-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-47页
附图第47-51页
作者简介第51页

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