摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
中英文缩略词表 | 第8-10页 |
第1章 引言 | 第10-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-27页 |
2.1 材料 | 第12-14页 |
2.1.1 细胞株来源 | 第12页 |
2.1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第13-14页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第14-26页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第14-15页 |
2.2.2 细胞培养 | 第15-17页 |
2.2.3 转染细胞 | 第17-18页 |
2.2.4 转染 48h 后,qRT-PCR 检测膀胱癌细胞 miR-200b 的表达 | 第18-20页 |
2.2.5 转染 48h 后,RT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1 和 Jagged-1 表达 | 第20-22页 |
2.2.6 转染 48h 后,Western-blot 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1 和 Jagged-1 蛋白表达 | 第22-24页 |
2.2.7 MTT 比色实验观察细胞耐药性的变化 | 第24-25页 |
2.2.8 Hoechst33342/PI 试剂盒检测细胞抗凋亡能力的改变 | 第25页 |
2.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡率的改变 | 第25页 |
2.2.10 Transwell 检测膀胱癌细胞系侵袭力的改变 | 第25-26页 |
2.3 统计学处理 | 第26-27页 |
第3章 结果 | 第27-42页 |
3.1 倒置显微镜下观察转染后的 T24、5637 细胞的变化 | 第27-28页 |
3.2 荧光显微镜下观察 T24、5637 细胞转染效率 | 第28页 |
3.3 转染 48h 后,qRT-PCR 检测 miR-200b 的表达 | 第28-30页 |
3.4 转染 48h 后,RT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1、Jagged-1 的表达变化 | 第30-34页 |
3.5 转染 48h 后,Western-blot 检测标记物 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1、Jagged-1 蛋白表达变化 | 第34-37页 |
3.6 MTT 比色实验观察细胞耐药性的变化 | 第37-38页 |
3.7 Hoechst33342/PI 双染检测细胞抗凋亡能力的变化 | 第38页 |
3.8 流式细胞术检测细胞凋亡率的改变 | 第38-41页 |
3.9 Transwell 检测膀胱癌细胞侵袭力的变化 | 第41-42页 |
第4章 讨论 | 第42-45页 |
第5章 结论和展望 | 第45-46页 |
5.1 结论 | 第45页 |
5.2 展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
综述 | 第50-56页 |
参考文献 | 第54-56页 |