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MicroRNA-200b调控膀胱癌发生EMT与Notch信号通路关系的实验研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
中英文缩略词表第8-10页
第1章 引言第10-12页
第2章 材料与方法第12-27页
    2.1 材料第12-14页
        2.1.1 细胞株来源第12页
        2.1.2 主要试剂第12-13页
        2.1.3 主要仪器与设备第13-14页
    2.2 实验方法与步骤第14-26页
        2.2.1 主要试剂的配制第14-15页
        2.2.2 细胞培养第15-17页
        2.2.3 转染细胞第17-18页
        2.2.4 转染 48h 后,qRT-PCR 检测膀胱癌细胞 miR-200b 的表达第18-20页
        2.2.5 转染 48h 后,RT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1 和 Jagged-1 表达第20-22页
        2.2.6 转染 48h 后,Western-blot 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1 和 Jagged-1 蛋白表达第22-24页
        2.2.7 MTT 比色实验观察细胞耐药性的变化第24-25页
        2.2.8 Hoechst33342/PI 试剂盒检测细胞抗凋亡能力的改变第25页
        2.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡率的改变第25页
        2.2.10 Transwell 检测膀胱癌细胞系侵袭力的改变第25-26页
    2.3 统计学处理第26-27页
第3章 结果第27-42页
    3.1 倒置显微镜下观察转染后的 T24、5637 细胞的变化第27-28页
    3.2 荧光显微镜下观察 T24、5637 细胞转染效率第28页
    3.3 转染 48h 后,qRT-PCR 检测 miR-200b 的表达第28-30页
    3.4 转染 48h 后,RT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1、Jagged-1 的表达变化第30-34页
    3.5 转染 48h 后,Western-blot 检测标记物 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、alpha-smooth muscle actin、Notch-1、Jagged-1 蛋白表达变化第34-37页
    3.6 MTT 比色实验观察细胞耐药性的变化第37-38页
    3.7 Hoechst33342/PI 双染检测细胞抗凋亡能力的变化第38页
    3.8 流式细胞术检测细胞凋亡率的改变第38-41页
    3.9 Transwell 检测膀胱癌细胞侵袭力的变化第41-42页
第4章 讨论第42-45页
第5章 结论和展望第45-46页
    5.1 结论第45页
    5.2 展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
综述第50-56页
    参考文献第54-56页

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