| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 植物热激反应的复杂性 | 第9-15页 |
| ·热激蛋白HSPs | 第9-12页 |
| ·热激转录因子 | 第12-13页 |
| ·抗氧化系统 | 第13页 |
| ·激素与植物耐热 | 第13-14页 |
| ·Ca~(2+)与植物耐热 | 第14页 |
| ·耐热性新成员 | 第14-15页 |
| 2 酵母双杂交技术的原理与应用 | 第15-20页 |
| ·酵母双杂交系统的基本原理 | 第16页 |
| ·酵母双杂交技术的实验策略 | 第16-17页 |
| ·酵母双杂交技术的新发展 | 第17-18页 |
| ·酵母双杂交技术的应用 | 第18-20页 |
| 第二部分 实验材料和方法 | 第20-34页 |
| 1 实验材料 | 第20-22页 |
| ·植物材料和生长条件 | 第20页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·酶和生化试剂 | 第20页 |
| ·PCR 引物及其序列 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·分析软件 | 第22页 |
| 2 实验方法 | 第22-34页 |
| ·基本的分子生物学方法 | 第22-26页 |
| ·atfes1a 突变体的筛选和分子鉴定 | 第26-27页 |
| ·hot-1 纯合突变体的筛选 | 第27-28页 |
| ·Salk-021784 突变体的回交实验 | 第28页 |
| ·atfes1a 突变体的热敏感表型分析 | 第28-29页 |
| ·Salk-021784 热敏感突变体的互补实验 | 第29页 |
| ·AtFes1A 敲除对热激响应基因的影响 | 第29-31页 |
| ·过表达 AtFes1A 拟南芥株系的分析 | 第31-32页 |
| ·酵母双杂交实验 | 第32-34页 |
| 第三部分 实验结果和分析 | 第34-51页 |
| 1 atfes1a 突变体的筛选和分子鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·atfes1a 突变体的 PCR 鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·atfes1a 突变体的 Western 鉴定结果 | 第35页 |
| 2 hot-1 纯合突变体的筛选结果 | 第35页 |
| 3 Salk-021784 突变体回交实验结果 | 第35-36页 |
| 4 atfes1a 突变体的热敏感表型 | 第36-40页 |
| ·Salk-021784 幼苗的热敏感表型 | 第37-38页 |
| ·高温对Salk-021784 下胚轴伸长的影响 | 第38-40页 |
| ·Salk-072075 突变体幼苗的热敏感表型 | 第40页 |
| 5 AtFes1A 突变体的互补分析结果 | 第40-42页 |
| ·互补载体构建 | 第40-41页 |
| ·互补转基因株系的获得和鉴定 | 第41页 |
| ·互补株系的获得耐热性分析结果 | 第41-42页 |
| 6 AtFes1A 敲除对热激响应基因的影响 | 第42-44页 |
| ·热激相关基因在 atfes1a 突变体中的转录本水平变化 | 第42-43页 |
| ·热激相关基因在 AtFes1A 突变体中的表达水平变化 | 第43-44页 |
| 7 过表达 AtFes1A 拟南芥株系的分析结果 | 第44-46页 |
| ·过表转基因株系的获得 | 第44页 |
| ·过表达 AtFes1A 对 Hsp70 和 Hsp101 的影响 | 第44-45页 |
| ·过表达 AtFes1A 拟南芥株系的基础耐热性分析结果 | 第45-46页 |
| 8 酵母双杂交实验结果 | 第46-51页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第46-49页 |
| ·转基因酵母蛋白表达情况 | 第49-51页 |
| 第四部分 讨论 | 第51-53页 |
| 1 AtFes1A 敲除导致拟南芥获得耐热性下降 | 第51页 |
| 2 高温条件下 AtFes1A 敲除导致拟南芥中 Hsp70 降解 | 第51页 |
| 3 AtFes1A 敲除导致拟南芥耐热性下降的可能机制 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
