| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 课题研究背景和意义 | 第10页 |
| 1.2 肿瘤干细胞研究现状 | 第10-11页 |
| 1.3 肿瘤干细胞的分离及鉴定 | 第11-14页 |
| 1.3.1 肿瘤干细胞的分离 | 第11-13页 |
| 1.3.2 肿瘤干细胞的鉴定 | 第13-14页 |
| 1.4 肿瘤干细胞的分离新策略 | 第14-18页 |
| 1.4.1 软纤维凝胶（soft fibrin gels）用于肿瘤干细胞的筛选 | 第14-15页 |
| 1.4.2 聚乙二醇（PEG）水凝胶用于肿瘤干细胞的筛选 | 第15-16页 |
| 1.4.3 透明质酸（HA）与干细胞 | 第16-17页 |
| 1.4.4 生长因子固定化技术 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题主要研究内容 | 第18-21页 |
| 1.5.1 细胞因子的固定化 | 第18-19页 |
| 1.5.2 生物活性水凝胶的建立 | 第19页 |
| 1.5.3 肿瘤干细胞的筛选以及鉴定 | 第19页 |
| 1.5.4 Cripto-1 封闭抗体对于肿瘤干细胞的治疗 | 第19-20页 |
| 1.5.5 技术路线 | 第20-21页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第21-31页 |
| 2.1 材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 细胞系和实验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第24页 |
| 2.1.5 实时定量 PCR 引物 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 细胞因子的固定化 | 第25页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.3 水凝胶弹性模量检测 | 第25页 |
| 2.2.4 肿瘤干细胞筛选 | 第25-26页 |
| 2.2.5 扫描电镜观察水凝胶及细胞克隆显微形貌 | 第26页 |
| 2.2.6 细胞微丝骨架蛋白观察 | 第26-27页 |
| 2.2.7 细胞免疫荧光检测分子标志物的表达 | 第27页 |
| 2.2.8 实时定量 PCR 技术检测干细胞分子标志物的表达 | 第27-29页 |
| 2.2.9 肿瘤干细胞体内成瘤实验 | 第29页 |
| 2.2.10 抗 Cripto-1 单克隆封闭抗体的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.11 死活细胞染色 | 第30页 |
| 2.2.12 统计分析 | 第30页 |
| 2.3 本章小结 | 第30-31页 |
| 第3章 生物活性水凝胶用于肿瘤干细胞筛选的研究 | 第31-43页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 水凝胶理化性能的研究 | 第31-34页 |
| 3.2.1 细胞因子的接枝固定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 海藻酸钠水凝胶流变学性能检测 | 第32-34页 |
| 3.3 生物活性水凝胶对肿瘤干细胞筛选的影响 | 第34-41页 |
| 3.3.1 水凝胶力学性能对肿瘤干细胞生长及增殖的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.2 细胞因子固定化对肿瘤干细胞生长及增殖的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.3 低浓度 LMW-HA 对肿瘤干细胞生长及增殖的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.5 高浓度 LMW-HA 对肿瘤干细胞生长及增殖的影响 | 第38-40页 |
| 3.3.6 HMW-HA 对肿瘤干细胞生长及增殖的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 肿瘤干细胞鉴定及治疗的研究 | 第43-54页 |
| 4.1 引言 | 第43页 |
| 4.2 肿瘤干细胞的鉴定 | 第43-51页 |
| 4.2.1 扫描电子显微镜（SEM）观察肿瘤干细胞外观形貌 | 第43-44页 |
| 4.2.2 肿瘤干细胞分子标志物的检测 | 第44-45页 |
| 4.2.3 肿瘤干细胞多药耐药蛋白 1（MDR1）的表达 | 第45-47页 |
| 4.2.4 双肾上腺皮质激酶 1（Dclk1）的表达 | 第47-48页 |
| 4.2.5 qRT-PCR 检测分子标志物 mRNA 的表达 | 第48-49页 |
| 4.2.6 体内成瘤性能检测 | 第49-51页 |
| 4.3 肿瘤干细胞的逆转治疗 | 第51-52页 |
| 4.3.1 肿瘤干细胞治疗后死活细胞染色 | 第51-52页 |
| 4.3.2 肿瘤干细胞治疗后成瘤能力检测 | 第52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
