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T细胞受体的核心岩藻糖基化调节双阳性(DP)阶段的胸腺发育

中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-17页
第一部分 核心岩藻糖基化在DP胸腺细胞中明显增多第17-22页
    材料和方法第17-20页
        1. 实验材料第17-18页
            1.1 实验对象第17页
            1.2 主要试剂第17-18页
            1.3 主要仪器第18页
        2. 实验方法第18-20页
            2.1 胸腺单细胞悬液的制备第18-19页
            2.2 不同发育阶段的细胞分选第19页
            2.3 细胞计数第19页
            2.4 细胞表面凝集素染色第19-20页
    结果第20-21页
        1.核心岩藻糖基化在整个胸腺细胞分化过程中的动态变化第20-21页
        2.Fut8~(-/-)胸腺细胞表面的核心岩藻糖基化第21页
    讨论与结论第21-22页
第二部分 Fut8 基因缺失导致DP胸腺细胞数目的显著减少第22-33页
    材料和方法第22-29页
        1. 实验材料第22-25页
            1.1 实验对象第22页
            1.2 主要试剂第22页
            1.3 主要仪器第22-23页
            1.4 相关试剂配制第23-25页
        2. 实验方法第25-29页
            2.1 免疫组化第25页
            2.2 细胞全蛋白的提取及浓度测定第25-26页
            2.3 蛋白免疫印迹第26-27页
            2.4 细胞流式分析第27页
            2.5 mRNA的提取及反转第27-28页
            2.6 荧光实时定量PCR第28-29页
    结果第29-32页
        1. Fut8~(-/-)小鼠显示胸腺发育异常第29-30页
        2. Fut8~(-/-)小鼠胸腺中DP胸腺细胞减少第30-31页
        3. Fut8~(-/-)DN细胞中DN4 阶段的细胞数目减少第31-32页
    讨论第32页
    结论第32-33页
第三部分 TCR核心岩藻糖基化缺失导致DP胸腺细胞增殖能力下降第33-43页
    材料和方法第33-37页
        1. 实验材料第33-34页
            1.1 实验对象第33页
            1.2 主要试剂第33-34页
            1.3 主要仪器第34页
            1.4 相关试剂配制第34页
        2. 实验方法第34-37页
            2.1 流式细胞染色第34-35页
            2.2 高效液相色谱层析第35页
            2.3 免疫沉淀第35页
            2.4 细胞的磷酸化处理第35页
            2.5 细胞表面蛋白酶切实验第35-36页
            2.6 荧光实时定量PCR的检测第36页
            2.7 增殖实验第36-37页
            2.8 细胞团的计数第37页
            2.9 细胞凋亡的检测第37页
    结果第37-42页
        1. Fut8~(-/-) DP胸腺细胞TCR的核心岩藻糖基化缺失第37-38页
        2. Fut8~(-/-) DP胸腺细胞TCR上的核心岩藻糖基化的缺失导致其信号转导能力弱第38-40页
        3. 核心岩藻糖基化的缺失导致Fut8~(-/-) DP细胞增殖能力下降第40-42页
    讨论第42页
    结论第42-43页
总结第43-44页
参考文献第44-48页
综述第48-57页
    参考文献第52-57页
攻读硕士期间发表论文情况第57-58页
致谢第58-59页

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