| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-36页 |
| 2.1 材料 | 第13-18页 |
| 2.1.1 实验大鼠、菌株、质粒、引物、载体、细胞等 | 第13页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第13-15页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第16-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-36页 |
| 2.2.1 MCF2L基因突变分析 | 第18页 |
| 2.2.2 MCF2L重组质粒的构建 | 第18-25页 |
| 2.2.3 MCF2L过表达及突变体腺病毒的构建 | 第25-29页 |
| 2.2.4 重组腺病毒感染滑膜成纤维细胞后IL-1β、MMP-13、PGE2炎症因子的检测及细胞凋亡分析 | 第29-36页 |
| 第三章 结果 | 第36-51页 |
| 3.1 MCF2L基因突变分析 | 第36-37页 |
| 3.1.1 COMSIC数据库查询MCF2L突变体 | 第36页 |
| 3.1.2 ENSEMBL和NCBI数据库查询MCF2L突变体 | 第36-37页 |
| 3.2 MCF2L重组质粒的构建 | 第37-43页 |
| 3.2.1 成纤维细胞的原代培养 | 第37-38页 |
| 3.2.2 免疫荧光鉴定滑膜成纤维细胞 | 第38页 |
| 3.2.3 目的基因MCF2L的PCR扩增 | 第38-39页 |
| 3.2.4 重组质粒的酶切鉴定及测序验证 | 第39-43页 |
| 3.3 MCF2L过表达及突变体腺病毒的构建 | 第43-47页 |
| 3.3.1 PCR介导的MCF2L基因突变 | 第43-45页 |
| 3.3.2 重组腺病毒酶切验证 | 第45页 |
| 3.3.3 重组腺病毒感染HEK 293细胞结果 | 第45-46页 |
| 3.3.4 PCR验证重组腺病毒的产生 | 第46-47页 |
| 3.4 重组腺病毒感染滑膜成纤维细胞后IL-1β、MMP-13、PGE2炎症因子的检测及细胞增殖、细胞凋亡分析 | 第47-51页 |
| 3.4.1 重组腺病毒感染SF结果 | 第47页 |
| 3.4.2 Q-PCR检测各组滑膜成纤维细胞中MCF2L的表达情况 | 第47-48页 |
| 3.4.3 WB检测各组细胞中MCF2L的表达 | 第48页 |
| 3.4.4 ELISA检测各组细胞上清中IL-1β、MMP-13、PGE2水平 | 第48-49页 |
| 3.4.5 MTT检测细胞增殖情况 | 第49-50页 |
| 3.4.6 细胞凋亡分析 | 第50-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 综述 | 第62-71页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 攻读硕士学位期间已完成的相关论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
