| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 黄萎病及其危害 | 第11-12页 |
| 1.2 大丽轮枝菌的侵染过程和致病机理 | 第12-13页 |
| 1.3 大丽轮枝菌致病相关基因的研究进展 | 第13页 |
| 1.4 利用农杆菌介导转化技术构建突变体库 | 第13-14页 |
| 1.5 T-DNA 侧翼序列的克隆 | 第14-15页 |
| 1.6 PEG 介导真菌的原生质体转化 | 第15-16页 |
| 1.7 目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 大丽轮枝菌 T-DNA 插入突变体库的评价 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 植株 | 第17页 |
| 2.1.3 试剂和仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 转化子的抗性筛选 | 第18页 |
| 2.2.2 生长速度的测定 | 第18页 |
| 2.2.3 产孢能力的测定 | 第18页 |
| 2.2.4 产微菌核能力的评价 | 第18页 |
| 2.2.5 致病力的测定 | 第18-19页 |
| 2.2.6 部分转化子的分子鉴定 | 第19-20页 |
| 2.2.7 数据统计 | 第20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-23页 |
| 2.3.1 转化子的培养性状 | 第20-21页 |
| 2.3.2 转化子的生长速度测定 | 第21页 |
| 2.3.3 转化子产孢能力的测定以及产微菌核能力的评价 | 第21页 |
| 2.3.4 转化子致病力的测定 | 第21-23页 |
| 2.3.5 转化子的分子鉴定 | 第23页 |
| 2.4 结论和讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 2-736 的生物学特性和致病相关基因的克隆 | 第25-36页 |
| 3.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 3.2.1 转化子 2-736 的表型评价 | 第25页 |
| 3.2.2 转化子 2-736 的分子鉴定 | 第25页 |
| 3.2.3 T-DNA 侧翼序列的分析 | 第25-28页 |
| 3.2.4 hiTail-PCR 产物的克隆 | 第28-30页 |
| 3.2.5 胶回收产物与克隆载体的连接 | 第30页 |
| 3.2.6 连接产物转化大肠杆菌 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-35页 |
| 3.3.1 转化子 2-736 的表型特点和分子鉴定 | 第31-33页 |
| 3.3.2 hiTail-PCR 三轮 PCR 产物的电泳分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 PCR 产物的克隆 | 第34页 |
| 3.3.4 T-DNA 侧翼序列的分析 | 第34-35页 |
| 3.4 结论和讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 转化子 2-736 的遗传互补 | 第36-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 4.1.1 材料 | 第36页 |
| 4.1.2 试剂 | 第36-37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 4.2.1 互补载体的构建 | 第37-42页 |
| 4.2.2 原生质体的制备和转化 | 第42-43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 互补载体的构建 | 第43-45页 |
| 4.3.2 原生质体的转化和互补转化子的筛选 | 第45页 |
| 4.3.3 互补转化子的 PCR 检测 | 第45-46页 |
| 4.4 结论和讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 附表 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 个人简介 | 第55页 |
