摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要英文缩写词 | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第10-16页 |
1.1 食管癌病因研究 | 第10页 |
1.2 人乳头瘤病毒疫苗研究 | 第10-14页 |
1.2.1 HPV 及其相关疾病 | 第10-12页 |
1.2.2 HPV 疫苗的研究现状 | 第12-13页 |
1.2.3 重组载体疫苗的研究 | 第13-14页 |
1.3 本课题研究内容 | 第14-15页 |
1.4 本课题技术路线 | 第15-16页 |
第2章 重组 DNA 疫苗及腺病毒疫苗免疫效果的研究 | 第16-36页 |
2.1 实验材料 | 第16-17页 |
2.1.1 工具酶、细胞和试剂 | 第16页 |
2.1.2 疫苗成分及来源 | 第16页 |
2.1.3 仪器和设备 | 第16-17页 |
2.1.4 实验动物 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-23页 |
2.2.1 DNA 疫苗 VR-HPV18L1 的制备及鉴定 | 第17-18页 |
2.2.2 小鼠品系和刺激性多肽的筛选 | 第18-20页 |
2.2.3 基因导入仪对 DNA 疫苗免疫效果的影响 | 第20页 |
2.2.4 多载体疫苗序贯重复免疫方案的设计 | 第20-21页 |
2.2.5 多载体疫苗免疫效果检测 | 第21-23页 |
2.3 实验结果和讨论 | 第23-34页 |
2.3.1. 小鼠品系和多肽筛选结果 | 第23-28页 |
2.3.2 基因导入仪对 DNA 疫苗免疫效果的影响 | 第28-30页 |
2.3.3 多载体疫苗免疫效果的检测 | 第30-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-36页 |
第3章 含 HPV18L1 基因的重组腺相关病毒的构建 | 第36-44页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 菌株和细胞 | 第36页 |
3.1.2 载体和试剂 | 第36页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
3.1.4 引物 | 第36-37页 |
3.2 实验方法 | 第37-39页 |
3.2.1 构建重组穿梭质粒 pAAV-HPV18L1 | 第37-38页 |
3.2.2 重组腺相关病毒 rAAV2/1-HPV18L1 的包装 | 第38-39页 |
3.2.3 重组腺相关病毒滴度的测定 | 第39页 |
3.2.4 重组腺相关病毒颗粒电镜检测 | 第39页 |
3.3 实验结果及讨论 | 第39-41页 |
3.3.1 PCR 扩增 HPV18L1 基因片段的结果 | 第39-40页 |
3.3.2 酶切鉴定重组质粒 pAAV-HPV18L1 结果 | 第40页 |
3.3.3 重组腺相关病毒的滴度测定结果 | 第40-41页 |
3.3.4 重组腺相关病毒的电镜检测结果 | 第41页 |
3.4 本章小结 | 第41-44页 |
第4章 重组腺相关病毒疫苗免疫效果的研究 | 第44-50页 |
4.1 实验材料 | 第44-45页 |
4.1.1 细胞和菌种 | 第44页 |
4.1.2 主要试剂 | 第44页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第44页 |
4.1.4 实验动物 | 第44-45页 |
4.2 实验方法 | 第45页 |
4.2.1 疫苗免疫方案设计 | 第45页 |
4.2.2 假病毒中和滴定检测体液免疫 | 第45页 |
4.2.3 ELISPOT 检测细胞免疫反应 | 第45页 |
4.3 实验结果和讨论 | 第45-48页 |
4.3.1 体液免疫结果 | 第45-46页 |
4.3.2 细胞免疫结果 | 第46-48页 |
4.4 本章小结 | 第48-50页 |
结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |