摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第10-22页 |
1.1 猪瘟 | 第10-12页 |
1.1.1 猪瘟概述 | 第10页 |
1.1.2 猪瘟的防控 | 第10-11页 |
1.1.3 猪瘟的流行情况调查 | 第11-12页 |
1.2 猪瘟病毒 | 第12-18页 |
1.2.1 猪瘟病毒概述 | 第12-14页 |
1.2.2 猪瘟病毒入侵机制 | 第14页 |
1.2.3 猪瘟病毒的分子生物学特征 | 第14-18页 |
1.3 猪瘟病毒常用的诊断方法 | 第18-20页 |
1.3.1 免疫学诊断方法 | 第18-19页 |
1.3.2 分子生物学诊断方法 | 第19-20页 |
1.4 单克隆抗体在猪瘟病毒中的应用 | 第20-21页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
2 猪瘟病毒的培养、纯化及检测 | 第22-42页 |
2.1 材料 | 第22-27页 |
2.1.1 病毒、细胞、质粒及菌种 | 第22页 |
2.1.2 实验仪器 | 第22-23页 |
2.1.3 主要试剂及耗材 | 第23-24页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第24-27页 |
2.1.5 实验动物 | 第27页 |
2.2 方法 | 第27-35页 |
2.2.1 猪瘟病毒石门株的培养 | 第27-28页 |
2.2.2 病毒的浓缩及纯化 | 第28-29页 |
2.2.3 猪瘟病毒鉴定 | 第29-32页 |
2.2.4 猪瘟病毒E0-E2融合蛋白的表达及纯化 | 第32-33页 |
2.2.5 动物免疫 | 第33-34页 |
2.2.6 动物免疫效价测定 | 第34-35页 |
2.3 结果 | 第35-40页 |
2.3.1 不同时间段病毒增殖情况检测结果 | 第35页 |
2.3.2 4FF柱纯化病毒收集峰 | 第35-36页 |
2.3.3 荧光定量RT-PCR鉴定CSFV纯化结果 | 第36-37页 |
2.3.4 IPMA鉴定CSFV纯化结果 | 第37-38页 |
2.3.5 电镜观察 | 第38页 |
2.3.6 E0-E2融合蛋白表达及纯化结果 | 第38-39页 |
2.3.7 抗CSFV多抗鼠血清效价的测定 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-41页 |
2.5 小结 | 第41-42页 |
3 猪瘟病毒单克隆抗体的制备及鉴定 | 第42-56页 |
3.1 材料 | 第42-43页 |
3.1.1 实验耗材及试剂 | 第42页 |
3.1.2 主要试剂的配制 | 第42-43页 |
3.1.3 实验动物及细胞 | 第43页 |
3.2 方法 | 第43-49页 |
3.2.1 骨髓瘤细胞的培养 | 第43页 |
3.2.2 融合鼠的选择及加强免疫 | 第43-44页 |
3.2.3 饲养细胞的制备 | 第44页 |
3.2.4 细胞融合 | 第44-45页 |
3.2.5 阳性克隆孔的筛选 | 第45-46页 |
3.2.6 阳性克隆孔的亚克隆 | 第46页 |
3.2.7 杂交瘤细胞株的冻存和复苏 | 第46页 |
3.2.8 IPMA法检测单克隆抗体特异性 | 第46-47页 |
3.2.9 杂交瘤细胞稳定性的鉴定 | 第47页 |
3.2.10 单克隆抗体亚型的鉴定 | 第47页 |
3.2.11 单克隆抗体腹水的制备及纯化 | 第47-48页 |
3.2.12 单克隆抗体腹水效价的测定 | 第48-49页 |
3.3 结果 | 第49-54页 |
3.3.1 杂交瘤细胞株的建立 | 第49页 |
3.3.2 阳性克隆孔筛选结果 | 第49-50页 |
3.3.3 阳性克隆孔亚克隆结果 | 第50-51页 |
3.3.4 单克隆抗体特异性鉴定结果 | 第51-52页 |
3.3.5 杂交瘤细胞株稳定性测定结果 | 第52-53页 |
3.3.6 单克隆抗体亚型鉴定结果 | 第53页 |
3.3.7 单抗腹水的纯化及ELISA效价测定结果 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-55页 |
3.5 小结 | 第55-56页 |
4 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 英文缩写词汇表 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第67页 |