中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第12-14页 |
文献综述 | 第14-24页 |
1 IL-8 的发现与产生 | 第14-15页 |
1.1 IL-8 的发现 | 第14页 |
1.2 IL-8 的产生 | 第14-15页 |
2 IL-8 基因结构、表达及调节 | 第15-16页 |
2.1 IL-8 基因结构 | 第15页 |
2.2 IL-8 表达与调节 | 第15-16页 |
3 IL-8 受体及 IL-8 作用机理 | 第16-18页 |
3.1 IL-8 受体 | 第16页 |
3.2 IL-8 作用机理 | 第16-18页 |
4 IL-8 的生物学活性及其在疾病中的作用 | 第18-20页 |
4.1 IL-8 的生物学活性 | 第18页 |
4.2 IL-8 与疾病 | 第18-20页 |
5 鱼类 IL-8 研究进展 | 第20-23页 |
5.1 鱼类 IL-8 的产生 | 第20页 |
5.2 鱼类 IL-8 基因结构 | 第20-22页 |
5.3 鱼类 IL-8 受体 | 第22页 |
5.4 鱼类 IL-8 功能研究 | 第22-23页 |
6 本研究目的意义 | 第23-24页 |
第一章 草鱼重组 IL-8 生物学活性研究 | 第24-49页 |
第一节 草鱼重组 IL-8 对草鱼头肾中性粒细胞的趋化作用 | 第24-39页 |
1 材料 | 第24-27页 |
1.1 实验动物 | 第24页 |
1.2 草鱼 IL-8 重组蛋白(rgcIL-8),Trx 蛋白表达体系 | 第24页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第24-25页 |
1.4 主要仪器 | 第25-26页 |
1.5 实验主要相关试剂的配置 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-32页 |
2.1 rgcIL-8 的 Ni-NTA 亲和层析纯化 | 第27-30页 |
2.2 Trx 可溶性蛋白的 Ni-NTA 亲和层析纯化 | 第30-31页 |
2.3 草鱼头肾细胞的获得 | 第31页 |
2.4 rgcIL-8 对草鱼头肾细胞的趋化作用 | 第31-32页 |
2.5 数据分析 | 第32页 |
3 结果 | 第32-37页 |
3.1 rgcIL-8 及 trx 蛋白的可溶性分析 | 第32-33页 |
3.2 纯化后 rgcIL-8、trx 蛋白的浓度及纯度分析 | 第33-35页 |
3.3 rgcIL-8 对草鱼头肾细胞的趋化活性 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第二节 草鱼重组 IL-8 蛋白的促炎作用 | 第39-49页 |
1 材料 | 第39-40页 |
1.1 实验动物 | 第39页 |
1.2 纯化的 rgcIL-8,Trx 蛋白 | 第39页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第39页 |
1.4 主要仪器 | 第39页 |
1.5 实验主要相关试剂的配置 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-43页 |
2.1 肌肉注射重组 IL-8 蛋白 | 第40-41页 |
2.2 组织采集 | 第41页 |
2.3 石蜡切片的制作 | 第41-42页 |
2.4 结果分析 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
第二章 草鱼重组 IL-8 蛋白多克隆抗体的制备 | 第49-63页 |
1 材料 | 第49-51页 |
1.1 实验动物 | 第49页 |
1.2 菌株 | 第49页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第49-50页 |
1.4 主要仪器 | 第50页 |
1.5 实验主要相关试剂的配置 | 第50-51页 |
2 方法 | 第51-56页 |
2.1 抗原的制备 | 第51-52页 |
2.2 带有 pET32a+ 载体的 BL21 菌体总蛋白的提取 | 第52页 |
2.3 免疫 BALB/c 小鼠 | 第52-53页 |
2.4 抗血清的收集 | 第53页 |
2.5 双向免疫扩散实验检测抗体 | 第53页 |
2.6 Western blot 检测抗体特异性 | 第53-54页 |
2.7 间接 ELISA 检测抗体的效价 | 第54-55页 |
2.8 间接 ELISA 检测草鱼 IL-8 蛋白方法的建立 | 第55-56页 |
3 结果 | 第56-61页 |
3.1 rgcIL-8 的纯化和鉴定 | 第56-57页 |
3.2 双向免疫扩散实验检测抗体 | 第57-58页 |
3.3 多克隆抗体的 Western blot 测定 | 第58-59页 |
3.4 多克隆抗体效价的测定 | 第59-60页 |
3.5 间接 ELISA 方法的建立 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
第三章 草鱼免疫相关组织 IL-8 蛋白的表达及其在炎症过程中的作用 | 第63-72页 |
1 材料 | 第63-64页 |
1.1 实验动物 | 第63页 |
1.2 主要试剂及耗材 | 第63页 |
1.3 主要仪器 | 第63-64页 |
1.4 实验主要相关试剂的配置 | 第64页 |
2 方法 | 第64-65页 |
2.1 草鱼各组织单细胞悬液的获得 | 第64-65页 |
2.2 荧光免疫检测 | 第65页 |
2.3 数据分析 | 第65页 |
3 结果 | 第65-69页 |
3.1 草鱼组织中相关细胞的集群分布 | 第65-66页 |
3.2 草鱼各组织中 IL-8 表达差异 | 第66-69页 |
3.2.1 正常生理状态下草鱼各组织中 IL-8 表达差异 | 第68-69页 |
3.2.2 LPS 诱导后草鱼相关组织中 IL-8 表达量的变化 | 第69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
全文结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-84页 |
攻读学位期间本人公开发表的论著、论文 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |