符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 麦类锈病 | 第12-14页 |
1.1.1 麦类锈病的危害 | 第12-13页 |
1.1.2 麦类作物的锈菌病原 | 第13-14页 |
1.2 植物抗病防卫反应 | 第14-19页 |
1.2.1 主效抗锈病基因 R 与病原菌互作的研究进展 | 第14-17页 |
1.2.2 植物抗病防卫反应中的基本信号通路 | 第17-18页 |
1.2.3 分子伴侣复合体参与 R 基因介导的抗病反应 | 第18-19页 |
1.3 植物抗病网络的研究进展 | 第19-24页 |
1.3.1 植物抗病网络的研究方法 | 第19-23页 |
1.3.2 植物抗病网络的研究进展 | 第23-24页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第24页 |
2 材料和方法 | 第24-36页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料及培养条件 | 第24-25页 |
2.1.2 菌株材料 | 第25页 |
2.1.3 质粒载体 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 酵母 cDNA 文库的构建 | 第25-28页 |
2.2.2 诱饵蛋白载体的构建 | 第28页 |
2.2.3 诱饵蛋白自我激发测试 | 第28-29页 |
2.2.4 酵母双杂筛选体系的构建 | 第29-30页 |
2.2.5 互作蛋白全长互作验证及功能预测 | 第30-31页 |
2.2.6 互作蛋白的功能验证 | 第31页 |
2.2.7 实验室常规实验方法 | 第31-36页 |
3 结果与分析 | 第36-52页 |
3.1 酵母双杂“Mate&Plate”文库的构建及评价 | 第36页 |
3.1.1 植物总 RNA 的提取 | 第36-39页 |
3.1.2 双链 cDNA 的合成及小片段的去除 | 第37-38页 |
3.1.3 酵母双杂交“Mate & Plate”文库的构建及质量评价 | 第38-39页 |
3.2 诱饵蛋白载体的构建及自我激发验证 | 第39-42页 |
3.2.1 诱饵蛋白载体的构建 | 第39-40页 |
3.2.2 诱饵蛋白的自我激发测试 | 第40-41页 |
3.2.3 诱饵蛋白之间的互作模式验证 | 第41-42页 |
3.3 酵母 cDNA 文库的筛库结果 | 第42-47页 |
3.3.1 大麦 Tamalpais 文库的筛选结果 | 第44-45页 |
3.3.2 小麦辉县红(CYR32)文库的筛选结果 | 第45页 |
3.3.3 山羊草 AL8/78(CYR32)文库的筛选结果 | 第45-46页 |
3.3.4 大麦 Morex(CYR32)文库的筛选结果 | 第46-47页 |
3.3.5 条锈菌 CYR32 文库的筛选结果 | 第47页 |
3.5 互作蛋白的功能验证 | 第47-52页 |
3.5.1 互作蛋白全长载体的构建及互作验证 | 第47-48页 |
3.5.2 HvVAMP 同源基因的互作验证 | 第48-49页 |
3.5.3 过量表达载体和沉默载体的构建 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 分子伴侣互作模式的保守性 | 第52页 |
4.2 寄主互作蛋白和锈菌互作蛋白筛选 | 第52-54页 |
4.3 酵母双杂交筛选互作结果的可靠性 | 第54-55页 |
4.4 下一步研究计划 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
附录 | 第61-67页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |